Tau (S305) musmonoklonal antikropp (ARA971)

Western blotting-analys av Tau (S305) av ARA6837.
Olika proteinprover kördes på 6-18% SDS-PAGE under reducerande betingelser och blottades på nitrocellulosamembran. ARA6837 användes som den primära antikroppen och peroxidaskonjugerad get-anti-mus-IgG användes som den sekundära antikroppen. Tau-bandet visualiserades med ECL Western Blotting Substrate.
Bana 1: 15 μg hjärnvävnadslysat
Bana 2: 15 μg råtthjärnvävnadslysat
Bana 3: 15 μg av mushjärnvävnad2-lysat
Resultat: ARA6837 kan detektera Tau genom Western blotting.

IHC-P utfördes med sektioner av formalin-fixerad, paraffin-inbäddad hjärnvävnad. Antigen återvanns genom tillsats av kokande Tris/EDTA-buffert pH 9 i en tryckkokare under 3 min. Endogen peroxidasaktivitet släcktes genom att inkubera sektionerna med 3% H2O2 under 30 minuter vid rumstemperatur. Sektionerna inkuberades sedan med primär antikropp (ARA6837) vid rumstemperatur under 1 timme. Poly-peroxidas-konjugerad get-anti-mus-IgG användes som den sekundära antikroppen. Diaminobensidin användes som kromogen. Sektionen motfärgades med hematoxylin. En vävnadssektion inkuberad med fosfatbuffrad saltlösning följt av inkubation med den sekundära antikroppen användes som bakgrundskontroll.
Resultat: Neuropil är positivt färgad.


Sandwich ELISA-analys av Tau (S305) av ARA6837 & ARA6844.
Mikrotiterplattor belades med ARA6844 som infångningsantikropp. Rekombinant pTau181-protein (kat. AXP6613) applicerades som antigen. Peroxidaskonjugerad pTau181-antikropp (ARA6837) tjänade som detektionsantikropp.
Resultat: ARA6837 och ARA6844 kan användas som ett matchat antikroppspar för att detektera och kvantifiera koncentrationen av pTau181.

Sandwich ELISA-analys av Tau (S305) av ARA6837 & ARA6848.
Mikrotiterplattor belades med ARA6848 som infångningsantikropp. Rekombinant pTau205-protein (kat. AXP6615) applicerades som antigen. Biotin-konjugerad pTau205-antikropp (ARA6837) tjänade som detektionsantikropp, följt av streptavidin-HRP-inkubation.
Resultat: ARA6837 och ARA6848 kan användas som ett matchat antikroppspar för att detektera och kvantifiera koncentrationen av pTau205.

Korsreaktivitet av ARA6837 till andra peptider och rekombinanta proteiner genom ELISA. Mikrotiterbrunnar belades med olika peptider och rekombinanta proteiner.
ARA6837 användes som den primära antikroppen och peroxidaskonjugerad get-anti-mus-IgG användes som den sekundära antikroppen.
Resultat: ARA6837 kan detektera Tau-proteiner oavsett fosforylering.

Immunfluorescensanalys av Tau (S305) av ARA6837. Immunfluorescensanalys av primära råttneuroner med Tau (S305) antikropp (ARA6837). Cellerna fixerades, permeabiliserades, blockerades och inkuberades med den primära antikroppen (1:250). Följt av sekundär antikroppsfärgning motfärgades kärnorna.


Epitopanalys av Tau (S305) med ARA6837 med ELISA.
Syntetiska peptider innehållande indikerade rester belades på mikrotiterbrunnar. Rekombinanta Tau (2-244), Tau (1-368), Tau (243-368) och Tau (1-441) proteiner med isoform P10636-8 eller Tau (1-758) med isoform P10636-1 belades också. Antikroppen ARA6837 användes som den primära antikroppen. Peroxidas-konjugerad get-anti-mus-IgG användes som den sekundära antikroppen, och signaler detekterades med en kolorimetrisk analys.
Resultat: ARA6837 känner igen Tau-protein som innehåller S305- och S356-peptider som delar en sekvens av HVPGGG.