Rat IL-2 ELISA Kit

Interleukin 2 (IL-2), även känd som T-cellstillväxtfaktor (TCGF), är en 15-18 kDa variabelt glykosylerad alfa -helixpolypeptid som är en medlem av den gemensamma gammakedjan (gamma c) cytokinfamiljen. Den existerar som en monomer och har en anmärkningsvärt kort halveringstid (<30 minuter). Humant IL-2 syntetiseras som en 153 aminosyror (aa) prekursor som innehåller en 20 aa signalsekvens plus en 133 aa mogen region. Den mogna regionen är alfa-helikal till naturen och innehåller ett utnyttjat O--kopplat glykosyleringsställe vid Thr3 plus tre cysteiner, varav två bildar en intrakedjedisulfidbindning som är väsentlig för aktivitet. Mogen mänsklig IL-2 delar 73%, 66%, 78% och 97% en identitet med hund-, råtta-, katt- respektive rhesusapa IL-2. Även om humant IL-2 bara delar ungefär 60 % aa identitet med den mycket polymorfa musen IL-2, är human IL-2 känt för att vara aktiv på mus-IL-2-responsiva celler. Celler som rapporterats utsöndra IL-2 inkluderar gamma δ T-celler, aktiverade konventionella CD4+ och CD8+ T-celler, neuroner, mikroglia och hematopoetiska stamceller.
Receptorn för IL-2 (IL-2 R) är sammansatt av tre subenheter, 55 kDa CD25/IL-2 R alfakedjan, 70 kDa IL-2 R betakedjan och 65 kDa Common gamma Chain. IL-2 binder först till CD25, det binära komplexet rekryterar sedan IL-2R beta och gamma c för att bilda det kvartära signalkomplexet. Förutom IL-2 används IL-2R beta av IL-15 i dess kvartära signalkomplex. gamma c fungerar också som en signalreceptor för IL-4, -7, -9, -15 och -21.
In vitro-studier har visat en viktig roll för IL-2 i T-cellsaktivering och expansion. In vivo är IL-2 avgörande för utveckling, underhåll och funktion av regulatoriska T-celler (Treg) som ger skydd mot autoimmun sjukdom. Å andra sidan kan IL-2 också främja autoimmun inflammation i målorgan genom dess roll i att reglera uttrycket av T-cellstrafikgener och produktion av Th2-cytokiner. Inom CD8+ T-cellsundergruppen är IL-2 väsentligt för optimala primära svar och differentiering till terminala effektorceller. IL-2 främjar också utvecklingen av aktiverade CD8+ T-celler till minnesceller.

pg/ml	O.D.		Genomsnittlig	Rättad
0.00	0.0645	0.0636	0.0641
10.97	0.0731	0.0733	0.0732	0.0092
32.92	0.0872	0.0873	0.0873	0.0232
98.77	0.1382	0.1433	0.1408	0.0767
296.30	0.2812	0.2953	0.2883	0.2242
888.89	0.6422	0.6543	0.6483	0.5842
2666.67	1.5432	1.5153	1.5293	1.4652
8000.00	3.0881	3.1932	3.1407	3.0766

	Intra-assay Precision			Inter-assay Precision
Provnummer	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Genomsnitt (pg/ml)	139	708.7	2461.3	141.5	712.2	2421.2
Standardavvikelse	7.5	21.9	120.7	9.3	34.2	130.7
Variationskoefficient (%)	5.4	3.1	4.9	6.6	4.8	5.4

Intra-assayprecision (precision inom en analys) Tre prover med känd koncentration testades tjugo gånger på en platta för att bedöma intra-assayprecisionen.

Inter-assayprecision (precision mellan analyser) Tre prover med känd koncentration testades sex gånger på en platta för att bedöma intra-assayprecisionen.

Återhämtningen av spetsen utvärderades genom att spika 3 nivåer av rått-IL-2 i ett hälsoråttserumprov. Det otillsatta serumet användes som blank i dessa experiment.

Återvinningen varierade från 83 % till 110 % med en total genomsnittlig återhämtning på 95 %.

Provmatris	Prov utvärderat	Område (pg/ml)	Detekterbar (%)	Medelvärde för detekterbar (pg/ml)
Serum	30	9,9-387,7	50	92.4

Serum/Plasma – Trettio prover från till synes friska råttor utvärderades med avseende på närvaron av IL-6 i denna analys. Ingen medicinsk historia var tillgänglig för donatorerna.

n.d. = ej-detekterbar. Prover uppmätta under känsligheten anses vara omöjliga att detektera.