NF-kappaB p65 (Phospho-T254) kanin polyklonal antikropp

MSDS

NF-kappaB p65 (Phospho-T254) Rabbit Polyclonal Antibody

Nyckelfunktioner och detaljer

Kanin polyklonal antikropp mot NF-kappaB p65 (Phospho-T254)

Mål: NF-kappaB p65 (Phospho-T254)
Källa/värd: Kanin
Reaktivitet: Människan, mus, råtta, nötkreatur, apa, gris
Klonalitet: Polyklonal
Applikationer: WB, IHC, IF/ICC, IP
Konjugering: Okonjugerad
Lagring: vid-20°C

Märke:

KAT.NR. : APA09489

US$ Välj

Storlek:

50 μL 100 μL

Trail, bulkstorlek eller anpassade önskemål Vänligen kontakta oss

Produktdetaljer

Bakgrund

NF-kappa-B är en pleiotrop transkriptionsfaktor som finns i nästan alla celltyper och är slutpunkten för en serie signaltransduktionshändelser som initieras av ett stort antal stimuli relaterade till många biologiska processer såsom inflammation, immunitet, differentiering, celltillväxt, tumörbildning och apoptos. NF-kappa-B är en homo- eller heterodimert komplex bildat av den Rel-liknande domänen-innehållande proteinerna RELA/p65, RELB, NFKB1/p105, NFKB1/p50, REL och NFKB2/p52. Det heterodimera RELA-NFKB1-komplexet verkar vara mest förekommande. Dimererna binder vid kappa-B-ställen i DNA från sina målgener och de individuella dimererna har distinkta preferenser för olika kappa-B-ställen som de kan binda med urskiljbar affinitet och specificitet.

Ansökan

För att säkerställa optimal analysprestanda rekommenderar AREX att man utför reagenstitrering skräddarsydd för varje testsystem för optimala detekteringsresultat.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:200
IF/ICC	1:50 - 1:200
IP	1:10 - 1:100

*Resultaten är provspecifika. Se dina lokala analysförhållanden och testparametrar för referens.

Översikt

Beskrivning	Kanin polyklonal antikropp mot NF-kappaB p65 (Phospho-T254)
Specificitet	Känner igen endogena nivåer av NF-kappaB p65-protein endast när det fosforyleras vid T254.
Antikroppstyp	Primär antikropp
Imnunogen	KLH-konjugerad syntetisk fosfopeptid motsvarande rester som omger T254 av humant NF-kappaB p65-protein. Den exakta sekvensen är proprietär.
Rening	Antikroppen renades genom immunogenaffinitetskromatografi.
Molekylvikt	Förutspått: 60 kD; Observerad: 65 kD
Form/buffert	Vätska i 0,42 % kaliumfosfat, 0,87 % natriumklorid, pH 7,3, 30 % glycerol och 0,01 % natriumazid.
Alternativa namn	NFKB3; Transkriptionsfaktor p65; Nukleär faktor NF-kappa-B p65-subenhet; Nukleär faktor av kappa lätt polypeptid genförstärkare i B - celler 3
Gensymbol	RELA
Entrez Gene	5970 (Human); 19697 (mus)
SwissProt	Q04206(Human); Q04207(mus)

*AREX optimerar kontinuerligt våra produkter. Webbsidans innehåll kanske inte återspeglar de senaste uppdateringarna. För frågor, vänligen kontakta info@arexbio.com eller din lokala distributör.
*Klonnummer, reaktivitet, källa/värd och klonalitet finns i avsnittet produktnamn och nyckelfunktioner ovan.

Data

Western blot-analys av NF-kappaB p65 (Phospho-T254) uttryck i MCF7-LPS-30mins (A), MCF7-LPS-15mins (B), MCF7-LPS-5mins (C), MCF7 (D), Hela-TNFa-15mins (E), Hela-TNFa-5mins. (Förutspådd bandstorlek: 60 kD; observerad bandstorlek: 65 kD)

Immunhistokemisk analys av NF-kappaB p65 (Phospho-T254) färgning i human bröstcancerformalinfixerad paraffininbäddad vävnadssektion. Sektionen förbehandlades med användning av värmemedierad antigenåtervinning med natriumcitratbuffert (pH 6,0). Sektionen inkuberades sedan med antikroppen vid rumstemperatur och detekterades med användning av ett HRP-konjugerat kompakt polymersystem. DAB användes som kromogen. Sektionen motfärgades sedan med hematoxylin och monterades med DPX.

Immunfluorescensanalys av NF-kappaB p65 (Phospho-T254) färgning i BV2-celler. Formalin-fixerade celler permeabiliserades med 0,1% Triton X-100 i TBS under 5-10 minuter och blockerades med 3% BSA-PBS under 30 minuter vid rumstemperatur. Celler undersöktes med den primära antikroppen i 3% BSA-PBS och inkuberades över natten vid 4 °C i en dold kammare. Celler tvättades med PBST och inkuberades med en AREX® Fluor 488 -konjugerad sekundär antikropp (grön) i PBS vid rumstemperatur i mörker. Phalloidin - AREX® Fluor 594 användes för att färga aktinfilament (röda). DAPI användes för att färga cellkärnorna (blå).

Direkt ELISA-antikroppsdos-responskurva med användning av Anti-NF-kappaB p65 (Phospho-T254) antikropp. Antigenkoncentrationen (fosfopeptid och icke-fosfopeptid) är 5 ug/ml. Get Anti-Kanin IgG (H&L) - HRP användes som den sekundära antikroppen, och signalen utvecklades av TMB-substrat.

Förvaring

Förvaras vid 4°C kortvarigt. För långtidsförvaring, förvara vid -20°C, undvik frys-/upptiningscykler.

Obs

Endast för forskningsanvändning. Ej för användning i diagnostiska procedurer.

Vanliga frågor

Vilka är huvudtyperna av forskningsantikroppar och hur skiljer de sig åt?

Forskningsantikroppar delas huvudsakligen in i monoklonala antikroppar och polyklonala antikroppar. Monoklonala antikroppar erbjuder vanligtvis högre specificitet och bättre batch-to-batch-konsistens, medan polyklonala antikroppar ofta ger starkare affinitet men kan visa mer variation mellan batcherna. Valet beror på dina specifika experimentella behov.

Hur vet jag om en forskningsantikropp är lämplig för mitt experiment?

Det rekommenderas att noggrant granska produktdatabladet för validerade tillämpningar, arters reaktivitet, rekommenderade spädningar och publicerade referenser. För nya antikroppar är det vanligtvis till hjälp att utföra en liten validering med positiva kontrollprover.

Kan felaktig förvaring av forskningsantikroppar påverka experimentella resultat?

Ja. Antikroppar är känsliga för temperatur, upprepade fryscykler och kontaminering. Felaktig lagring kan leda till minskad aktivitet, ökad bakgrund eller svagare signaler. Det är bäst att följa förvaringsinstruktionerna i produktdatabladet.

Varför fungerar inte den rekommenderade utspädningen i databladet bra i mitt experiment?

Den rekommenderade utspädningen baseras på leverantörens testförhållanden. Faktorer som provtyp, fixeringsmetod och detektionssystem i ditt labb kan påverka den optimala arbetskoncentrationen. Att utföra en utspädningsserieoptimering i ditt eget system är ofta nödvändigt.

Vilka försiktighetsåtgärder ska jag vidta när jag använder en nyinköpt forskningsantikropp för första gången?

Det är lämpligt att kort centrifugera antikroppen (särskilt koncentrerade eller lyofiliserade sådana), och sedan utföra ett småskaligt pilotexperiment med de rekommenderade förhållandena. Att registrera batchnummer och användningsdatum är också användbart för framtida spårning.

Nya produkter

CMV Mouse Monoclonal Antibody(8B1.2, 1G5.2 & 2D4.2)

CMV mus monoklonal antikropp (8B1.2, 1G5.2 & 2D4.2)

PE-labled Human IgG1 Mouse Monoclonal Antibody(ARA651)

PE-märkt human IgG1 mus monoklonal antikropp (ARA651)

PE-labled CD43 Mouse Monoclonal Antibody(ARA652)

PE-märkt CD43 mus monoklonal antikropp (ARA652)

Sphingosine 1-Phosphate ELISA Kit

Human NGAL ELISA Kit

Human KIM-1 ELISA Kit