Human IL-1RA/IL-1F3 ELISA Kit

Interleukin-1-receptorantagonist (IL-1ra; även känd som IL-1F3) är en 22-25 kDa medlem av IL-1-familjen av cytokiner. För närvarande finns det 11 familjemedlemmar (IL-1F1-F11), varav nio bildar ett IL-1-genkluster på humant Ch2. Varje IL-1-familjemedlem innehåller ett IL-1-fald. Denna veckning genereras av 12 packade beta -ark som samverkar för att bilda en beta -trefoil struktur. Lite aminosyra (aa) homologi krävs för att uppnå denna struktur, och detta förklarar den låga aa identiteten bland IL-1 familjemedlemmar. IL-1ra är en ren cytokinreceptorantagonist som inte har någon signaltransduktion-initierande aktivitet. Det är ett akutfasprotein som finns för att dämpa inflammation. IL-1(beta) produceras initialt av monocyter som svar på en mängd olika stimuli. Cirkulerande IL-1 binder sedan till brett uttryckta IL-1 typ I-receptorer (IL-1 RI) och initierar ett antal pro-inflammatoriska händelser. På endotelceller (EC) inducerar IL-1 frisättning av PGE2 och IL-6, vilket genererar feber, trombocytos och proteinproduktion i akut fas i levern. I synovialleder inducerar IL-1 kondrocyt NO-produktion, en händelse som leder till minskad kollagensyntes och kondrocytapoptos. Slutligen ökar IL-1 antalet neutrofiler, både i blod och vävnad, och kan således främja en pro-inflammatorisk miljö på flera platser. IL-1ra blockerar IL-1-verkan genom kompetitiv hämning. Mer korrekt, även om IL-1ra fyller IL-1-bindningsstället i IL-1 RI, är det inte heller i stånd att orkestrera skapandet av ett signal-transducerande IL-1 RI:IL-1 R Accessory protein (IL-1 R AcP) heterodimerkomplex. Effektiva IL-1ra-koncentrationer är i allmänhet 100-faldigt högre än lokala IL-1-koncentrationer. Detta beror på att IL-1ra-halveringstiden är bara 6 minuter, och mycket få IL-1 typ I-receptorer behöver engageras av IL-1 för att framkalla ett cellulärt svar.

Humant IL-1ra syntetiseras som en 177 aa prekursor som innehåller en 25 aa signalsekvens och en 152 aa mogen region. Även om den innehåller en IL-1-cytokinveckning, saknar den tydligen två strukturella motiv som möjliggör aktivering av IL-1-receptorheterodimeren. Först och efter bindning till IL-1 RI utesluter närvaron av Ile 51-His 54 och Lys 145 i den mogna molekylen rekrytering av IL-1 R AcP. För det andra finns det inget identifierbart C-terminalt lektinsegment som antas hjälpa till att rekrytera en accessorisk signalkomponent. Moget humant IL-1ra är 77% och 82% aa identiskt med mus- respektive hund-IL-1ra, och humant IL-1ra hämmar IL-1-aktivitet på musceller. Ett antal celltyper uttrycker IL-1ra, inklusive monocyter, Sertoli-celler, hepatocyter, adipocyter, synoviala fibroblaster, mastceller, pankreatiska beta -celler och tarmepitelceller. Det finns minst tre intracellulära IL-1ra-isoformer (icIL-1ra1, 2 och 3). Alla visar N-terminal variation och alla innehåller aminosyrorna 35-177 av den utsöndrade prekursorn. Intracellulärt IL-1ra1 är av särskilt intresse, eftersom det rapporteras att "utsöndras" av endotelceller och binder till IL-1 RI på ett antagonistiskt sätt. Intracellulär IL-1ra1 är 159 aa lång och visar en 3 aa substitution för de första 21 aa:erna av signalsekvensen för IL-lra.

Serum/plasma – Trettio prover från till synes friska frivilliga utvärderades med avseende på närvaron av IL-1RA i denna analys. Ingen medicinsk historia var tillgänglig för donatorerna.