AP2 alfa/beta kanin polyklonal antikropp

Nyckelfunktioner och detaljer

Kanin polyklonal antikropp mot AP2 alfa/beta
  • Mål: AP2 alfa/beta
  • Källa/värd: Kanin
  • Reaktivitet: Människan, mus, råtta, kyckling, gris, får
  • Klonalitet: Polyklonal
  • Applikationer: WB, IHC, IF/ICC, Chip, EMSA
  • Konjugering: Okonjugerad
  • Lagring: vid-20°C
  • Märke:
Produktinformation
Bakgrund
Sekvens-specifikt DNA-bindande protein som interagerar med inducerbara virala och cellulära förstärkarelement för att reglera transkription av utvalda gener. AP-2-faktorer binder till konsensussekvensen 5'-GCCNNNGGC-3' och aktiverar gener involverade i ett stort spektrum av viktiga biologiska funktioner inklusive korrekt utveckling av ögon, ansikte, kroppsvägg, lem och neuralrör. De undertrycker också ett antal gener inklusive MCAM/MUC18, C/EBP alfa och MYC. AP-2-alfa är det enda AP-2-proteinet som krävs för tidig morfogenes av linsvesikeln. Tillsammans med CITED2-koaktivatorn stimulerar PITX2 P1-promotortranskriptionsaktiveringen. Associerar med kromatin till PITX2 P1-promotorregionen.
Ansökan
För att säkerställa optimal analysprestanda rekommenderar AREX att man utför reagenstitrering skräddarsydd för varje testsystem för optimala detekteringsresultat.

WB

1:500 - 1:1000

IHC

1:100 - 1:200

IF/ICC

1:100 - 1:500

Chip

1:100 - 1:500

EMSA

Använd i en analysberoende spädning

*Resultaten är provspecifika. Se dina lokala analysförhållanden och testparametrar för referens.
Översikt

Beskrivning

Kanin polyklonal antikropp mot AP2 alfa/beta

Specificitet

Känner igen endogena nivåer av AP2 alfa/beta-protein.

Antikroppstyp

Primär antikropp

Imnunogen

KLH-konjugerad syntetisk peptid som omfattar en sekvens inom C-term-regionen av humant AP2 alfa/beta. Den exakta sekvensen är proprietär.

Rening

Antikroppen renades genom immunogenaffinitetskromatografi.

Molekylvikt

Förutspått: 48; Observerad: 48 kD

Form/buffert

Vätska i 0,42 % kaliumfosfat, 0,87 % natriumklorid, pH 7,3, 30 % glycerol och 0,01 % natriumazid.

Alternativa namn

TFAP2A; AP2TF; TFAP2; Transkriptionsfaktor AP-2-alfa; AP2-alfa; AP-2 transkriptionsfaktor; Aktiverande förstärkare-bindande protein 2-alfa; Aktivatorprotein 2; AP-2; TFAP2B; Transkriptionsfaktor AP-2-beta; AP2-beta; Aktiverande förstärkare-bindande protein 2-beta

Gensymbol

TFAP2A; TFAP2B

Entrez Gene

7020(Människa); 21418; 21419(mus)

SwissProt

P05549; Q92481(Human); P34056; Q61313(mus); P58197(råtta)

*AREX optimerar kontinuerligt våra produkter. Webbsidans innehåll kanske inte återspeglar de senaste uppdateringarna. För frågor, vänligen kontakta info@arexbio.com eller din lokala distributör.
*Klonnummer, reaktivitet, källa/värd och klonalitet finns i avsnittet produktnamn och nyckelfunktioner ovan.
Data

Western blot-analys av AP2 alfa/beta-uttryck i PC3 (A), MCF7 (B), Myla2059 (C) helcellslysat. (Förutspådd bandstorlek: 48; 50 kD; observerad bandstorlek: 48 kD)

Immunhistokemisk analys av AP2 alfa/beta-färgning i human lungcancer formalinfixerad paraffininbäddad vävnadssektion. Sektionen förbehandlades med användning av värmemedierad antigenåtervinning med natriumcitratbuffert (pH 6,0). Sektionen inkuberades sedan med antikroppen vid rumstemperatur och detekterades med användning av ett HRP-konjugerat kompakt polymersystem. DAB användes som kromogen. Sektionen motfärgades sedan med hematoxylin och monterades med DPX.

Immunfluorescensanalys av AP2 alfa/beta-färgning i HepG2-celler. Formalin-fixerade celler permeabiliserades med 0,1% Triton X-100 i TBS under 5-10 minuter och blockerades med 3% BSA-PBS under 30 minuter vid rumstemperatur. Celler undersöktes med den primära antikroppen i 3% BSA-PBS och inkuberades över natten vid 4 °C i en fuktad kammare. Celler tvättades med PBST och inkuberades med en DyLight 594-konjugerad sekundär antikropp (röd) i PBS vid rumstemperatur i mörker.

Anti-AP2 alfa/beta-antikropp användes i en Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA) för att superskifta protein-DNA-komplexet. Radiomärkta, dubbelsträngade DNA-oligonukleotider (10 000 cpm per bana) som hyser ett bindningsställe för AP2 alfa/beta inkuberades med varje 2 ug kärnextrakt (NE) från HeLa- respektive Caski-celler. Prover inkuberades i 30 minuter vid rumstemperatur för att möjliggöra bildandet av protein-DNA-komplex. Anti-AP2 alfa/beta-antikropp sattes till proverna (enligt indikation) och inkuberades i ytterligare 60 minuter vid 4°C. Prover separerades i en 5,5 % PAGE. Gelen torkades under vakuum och för autoradiografi exponerades en röntgenfilm med en intensifierande skärm i 2 dagar vid -80°C. Specifika protein-DNA-komplex överskiftades kvantitativt med Anti-AP2 alfa/beta-antikropp, vilket verifierade bindningen av AP2 alfa/beta till DNA-oligonukleotiden.

ChIP-analys av lysat av livmoderhalscancercellinjer, inkuberat i 12 timmar vid 4°C. Tvärbindning (X-ChIP) med formaldehyd i 10 minuter. Detektionssteg: Semikvantitativ PCR. Positiv kontroll: Tumörcellinjer Hela. Negativ kontroll: Humana primära keratinocyter.

Förvaring
Förvaras vid 4°C kortvarigt. För långtidsförvaring, förvara vid -20°C, undvik frys-/upptiningscykler.
Obs
Endast för forskningsanvändning. Ej för användning i diagnostiska procedurer.
Vanliga frågor
Vilka är huvudtyperna av forskningsantikroppar och hur skiljer de sig åt?
Forskningsantikroppar delas huvudsakligen in i monoklonala antikroppar och polyklonala antikroppar. Monoklonala antikroppar erbjuder vanligtvis högre specificitet och bättre batch-to-batch-konsistens, medan polyklonala antikroppar ofta ger starkare affinitet men kan visa mer variation mellan batcherna. Valet beror på dina specifika experimentella behov.
Hur vet jag om en forskningsantikropp är lämplig för mitt experiment?
Det rekommenderas att noggrant granska produktdatabladet för validerade tillämpningar, arters reaktivitet, rekommenderade spädningar och publicerade referenser. För nya antikroppar är det vanligtvis till hjälp att utföra en liten validering med positiva kontrollprover.
Kan felaktig förvaring av forskningsantikroppar påverka experimentella resultat?
Ja. Antikroppar är känsliga för temperatur, upprepade fryscykler och kontaminering. Felaktig lagring kan leda till minskad aktivitet, ökad bakgrund eller svagare signaler. Det är bäst att följa förvaringsinstruktionerna i produktdatabladet.
Varför fungerar inte den rekommenderade utspädningen i databladet bra i mitt experiment?
Den rekommenderade utspädningen baseras på leverantörens testförhållanden. Faktorer som provtyp, fixeringsmetod och detektionssystem i ditt labb kan påverka den optimala arbetskoncentrationen. Att utföra en utspädningsserieoptimering i ditt eget system är ofta nödvändigt.
Vilka försiktighetsåtgärder ska jag vidta när jag använder en nyinköpt forskningsantikropp för första gången?
Det är lämpligt att kort centrifugera antikroppen (särskilt koncentrerade eller lyofiliserade sådana), och sedan utföra ett småskaligt pilotexperiment med de rekommenderade förhållandena. Att registrera batchnummer och användningsdatum är också användbart för framtida spårning.
Nya produkter
Ta kontakt med AREX
Namn:*
Tel/telefon:*
Företag:*
E-post:*
Förfrågan:
Captcha*
Att skicka in din e-postinformation innebär att du är villig att ta emot e-postinformation från AREX angående teknik, applikationer, produkter och evenemang. Genom att klicka på knappen 'avsluta prenumeration' i e-postmeddelandet eller genom att kontakta info@arexbio.com Du kan när som helst avregistrera dig genom att skicka ett e-postmeddelande. Angående din dataanvändningsinformation, vänligen se vårsekretesspolicy.
© AREX 2024. Alla rättigheter reserverade. Webbplatskarta
3.009442s