Rat TNF-α ELISA Kit
Protokollhäfte
Nyckelfunktioner och detaljer
- Specifikation:
- Känslighet:
- Standardkurvområde:
- Standardkurvgradient:
- Antal inkubationer:
- Provvolym:
- Analystyp:
- Driftslängd:
-
Märke:
KAT.NR. : AER0007
US$ Välj
US$ Välj
Storlek:
Trail, bulkstorlek eller anpassade önskemål Vänligen kontakta oss
Produktdetaljer
Bakgrund
Tumörnekrosfaktor alfa (TNF-alfa ), även känd som kakektin och TNFSF1A, är den prototypiska liganden i TNF-superfamiljen. Det är en pleiotropisk molekyl som spelar en central roll i inflammation, utveckling av immunsystemet, apoptos och lipidmetabolism. TNF-alfa är också involverat i ett antal patologiska tillstånd inklusive astma, Crohns sjukdom, reumatoid artrit, neuropatisk smärta, fetma, typ 2-diabetes, septisk chock, autoimmunitet och cancer.
Mus TNF-alfa syntetiseras som ett 26 kDa typ II transmembranprotein som består av en 35 aminosyror (aa) cytoplasmatisk domän, ett 21 aa transmembransegment och en 179 aa extracellulär domän (ECD). Inom ECD delar mus-TNF-alfa 95% aa-identitet med råtta och 80% aa-identitet med hund-, häst-, katt-, människa-, kanin- och svin-TNF-alfa. Det produceras av en mängd olika immun-, epitel-, endotel- och tumörceller. TNF-alfa sätts samman intracellulärt för att bilda en icke-kovalent kopplad homotrimer som uttrycks på cellytan.
Cellyt-TNF-alfa kan både inducera lys av tumörceller och virusinfekterade celler och generera sin egen nedströms cellsignalering efter ligering av löslig TNF RI. Utsöndring av membranbunden TNF-alfa genom TACE/ADAM17 frisätter det bioaktiva cytokinet, en 55 kDa löslig trimer som innehåller den extracellulära TNF-alfadomänen.
TNF-alfa binder den allestädes närvarande 55-60 kDa TNF RI och den hematopoetiska cellen-begränsade 78-80 kDa TNF RII, som båda också uttrycks som homotrimerer. Både typ I- och typ II-receptorer binder TNF-alfa med jämförbar affinitet och kan främja NFkB-aktivering. Endast TNF RI innehåller emellertid en cytoplasmatisk dödsdomän som utlöser aktiveringen av apoptos. Lösliga former av båda typerna av receptorer frisätts i humant serum och urin och kan neutralisera den biologiska aktiviteten av TNF.
Mus TNF-alfa syntetiseras som ett 26 kDa typ II transmembranprotein som består av en 35 aminosyror (aa) cytoplasmatisk domän, ett 21 aa transmembransegment och en 179 aa extracellulär domän (ECD). Inom ECD delar mus-TNF-alfa 95% aa-identitet med råtta och 80% aa-identitet med hund-, häst-, katt-, människa-, kanin- och svin-TNF-alfa. Det produceras av en mängd olika immun-, epitel-, endotel- och tumörceller. TNF-alfa sätts samman intracellulärt för att bilda en icke-kovalent kopplad homotrimer som uttrycks på cellytan.
Cellyt-TNF-alfa kan både inducera lys av tumörceller och virusinfekterade celler och generera sin egen nedströms cellsignalering efter ligering av löslig TNF RI. Utsöndring av membranbunden TNF-alfa genom TACE/ADAM17 frisätter det bioaktiva cytokinet, en 55 kDa löslig trimer som innehåller den extracellulära TNF-alfadomänen.
TNF-alfa binder den allestädes närvarande 55-60 kDa TNF RI och den hematopoetiska cellen-begränsade 78-80 kDa TNF RII, som båda också uttrycks som homotrimerer. Både typ I- och typ II-receptorer binder TNF-alfa med jämförbar affinitet och kan främja NFkB-aktivering. Endast TNF RI innehåller emellertid en cytoplasmatisk dödsdomän som utlöser aktiveringen av apoptos. Lösliga former av båda typerna av receptorer frisätts i humant serum och urin och kan neutralisera den biologiska aktiviteten av TNF.
Typiska data
| pg/ml | O.D. | Genomsnittlig | Rättad | |
| 0.00 | 0.0353 | 0.0308 | 0.0331 | |
| 1.37 | 0.0482 | 0.0401 | 0.0442 | 0.0111 |
| 4.12 | 0.0569 | 0.0541 | 0.0555 | 0.0225 |
| 12.35 | 0.1048 | 0.0974 | 0.1011 | 0.0681 |
| 37.04 | 0.2352 | 0.2276 | 0.2314 | 0.1984 |
| 111.11 | 0.6121 | 0.5822 | 0.5972 | 0.5641 |
| 333.33 | 1.5680 | 1.4950 | 1.5315 | 1.4985 |
| 1000.00 | 3.4880 | 3.3700 | 3.4290 | 3.3960 |
Precision
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
| Provnummer | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| Genomsnitt (pg/ml) | 23.2 | 99.7 | 315.4 | 21.5 | 96.1 | 288.4 |
| Standardavvikelse | 1.3 | 4.3 | 12.8 | 6.9 | 3.1 | 1.0 |
| Variationskoefficient (%) | 5.5 | 4.3 | 4.1 | 2.4 | 3.3 | 4.8 |
Intra-assayprecision (precision inom en analys) Tre prover med känd koncentration testades tjugo gånger på en platta för att bedöma intra-assayprecisionen.
Inter-assayprecision (precision mellan analyser) Tre prover med känd koncentration testades sex gånger på en platta för att bedöma intra-assayprecisionen.
Spike Recovery
Spike-återvinningen utvärderades genom att spika 3 nivåer av humant IL-6 i ett hälsoråttserumprov. Det otillsatta serumet användes som blank i detta experiment. Återvinningen varierade från 97 % till 108 % med en total genomsnittlig återhämtning på 103 %.
Exempelvärden
| Provmatris | Prov utvärderat | Område (pg/ml) | Detekterbar (%) | Medelvärde för detekterbar (pg/ml) |
| Serum | 30 | 1,82-3,57 | 100 | 2.94 |
Serum/Plasma – Trettio prover från till synes friska råttor utvärderades med avseende på närvaron av TNF-α i denna analys. Ingen medicinsk historia var tillgänglig för donatorerna.
n.d. = ej-detekterbar. Prover uppmätta under känsligheten anses vara omöjliga att detektera.
Nya produkter
