Mus TNF-α ELISA Kit

Protokollhäfte

Nyckelfunktioner och detaljer

Specifikation: 96 Test
Känslighet: 0,097 pg/ml (10 μl)
Standardkurvområde: 1,37~1000 pg/ml
Standardkurvgradient: 7 poäng/3 veck
Antal inkubationer: 2
Provvolym: 10 μl
Analystyp: Smörgås Elisa
Driftslängd: 120 min

Märke:

KAT.NR. : AEM0010

US$ Välj

Storlek:

96T

Trail, bulkstorlek eller anpassade önskemål Vänligen kontakta oss

Produktdetaljer

Bakgrund

Tumörnekrosfaktor alfa (TNF-alfa ), även känd som kakektin och TNFSF1A, är den prototypiska liganden i TNF-superfamiljen. Det är en pleiotropisk molekyl som spelar en central roll i inflammation, utveckling av immunsystemet, apoptos och lipidmetabolism. TNF-alfa är också involverat i ett antal patologiska tillstånd inklusive astma, Crohns sjukdom, reumatoid artrit, neuropatisk smärta, fetma, typ 2-diabetes, septisk chock, autoimmunitet och cancer. - Mus TNF-alfa syntetiseras som ett 26 kDa typ II transmembranprotein som består av en 35 aminosyror (aa) cytoplasmatisk domän, ett 21 aa transmembransegment och en 179 aa extracellulär domän (ECD). Inom ECD delar mus-TNF-alfa 95% aa-identitet med råtta och 80% aa-identitet med hund-, häst-, katt-, människa-, kanin- och svin-TNF-alfa. Det produceras av en mängd olika immun-, epitel-, endotel- och tumörceller. TNF-alfa sätts samman intracellulärt för att bilda en icke-kovalent kopplad homotrimer som uttrycks på cellytan. Cellyt-TNF-alfa kan både inducera lys av tumörceller och virusinfekterade celler och generera sin egen nedströms cellsignalering efter ligering av löslig TNF RI. Utsöndring av membranbunden TNF-alfa genom TACE/ADAM17 frisätter det bioaktiva cytokinet, en 55 kDa löslig trimer som innehåller den extracellulära TNF-alfadomänen. - TNF-alfa binder den allestädes närvarande 55-60 kDa TNF RI och den hematopoetiska cellen-begränsade 78-80 kDa TNF RII, som båda också uttrycks som homotrimerer. Både typ I- och typ II-receptorer binder TNF-alfa med jämförbar affinitet och kan främja NFkB-aktivering. Endast TNF RI innehåller emellertid en cytoplasmatisk dödsdomän som utlöser aktiveringen av apoptos. Lösliga former av båda typerna av välgörenhet frigörs i humant serum och urin och kan neutralisera den biologiska aktiviteten av TNF.

Typiska data

pg/ml	O.D.		Genomsnittlig	Rättad
0.00	0.0121	0.0111	0.0116
1.37	0.0242	0.0223	0.0233	0.0117
4.12	0.0482	0.0444	0.0463	0.0347
12.35	0.1134	0.1092	0.1113	0.0997
37.04	0.3165	0.3032	0.3099	0.2983
111.11	0.8042	0.7996	0.8019	0.7903
333.33	1.9672	1.9564	1.9618	1.9502
1000.00	4.1683	4.2715	4.2199	4.2083

Precision

	Intra-assay Precision			Inter-assay Precision
Provnummer	S1	S2	S3	S1	S2	S3
Provnummer	22	22	22	6	6	6
Genomsnitt (pg/ml)	16.1	80.4	271.7	14	75.2	236.7
Standardavvikelse	1.1	4.8	16	0.3	4	10.8
Variationskoefficient (%)	6.5	5.9	5.9	2	5.3	4.6

Intra-assayprecision (precision inom en analys) Tre prover med känd koncentration testades tjugo gånger på en platta för att bedöma intra-assayprecisionen.

Inter-assayprecision (precision mellan analyser) Tre prover med känd koncentration testades sex gånger på en platta för att bedöma intra-assayprecisionen.

Spike Recovery

Spetsåtervinningen utvärderades genom att spika 3 nivåer av mus-TNF-alfa i musserumprov. Det otillsatta serumet användes som blank i detta experiment.

Återvinningen varierade från 107 % till 132 % med en total genomsnittlig återhämtning på 116 %.

Exempelvärden

Provmatris	Prov utvärderat	Område (pg/ml)	Detekterbar (%)	Medelvärde för detekterbar (pg/ml)
Serum	30	n.d.-0,28	33	0.16

Serum/Plasma – Trettio prover från till synes friska möss utvärderades med avseende på närvaron av TNF alfa i denna analys. Ingen medicinsk historia var tillgänglig för donatorerna.

n.d. = ej-detekterbar. Prover uppmätta under känsligheten anses vara omöjliga att detektera.

Nya produkter

Antigenåtervinningslösning II (EDTA)

Antigenåtervinningslösning I (citrat)

Hyaluronsyra ELISA Kit

Human FADS2 ELISA Kit

AREX® Fluor 488 Rabbit IgG (H&L) Donkey Polyclonal Antibody

AREX® Fluor 488 Rabbit IgG (H&L) Åsna polyklonal antikropp

AREX® Fluor 647 Mouse IgG (H+L) F(ab')2 Fragment Donkey Polyclonal Antibody

AREX® Fluor 647 Mus IgG (H+L) F(ab')2 Fragment Åsna polyklonal antikropp