Hans tagg Rabbit Monoclonal Antibody (ARA796)

Datablad

MSDS

His tag Rabbit Monoclonal Antibody(ARA796)

Nyckelfunktioner och detaljer

Mål: Hans tagg
Källa/värd: Kanin
Reaktivitet: Artoberoende
Klonalitet: Monoklonal
Applikationer: WB,IF/ICC,FC,IP
Konjugering: Okonjugerad
Lagring: vid-20°C

Märke:

KAT.NR. : ARA6583

US$ Välj

Storlek:

50 μL 100 μL 500 μL 1

Trail, bulkstorlek eller anpassade önskemål Vänligen kontakta oss

Produktdetaljer

Bakgrund

Epitoptaggar är användbara för märkning och detektion av proteiner med användning av immunoblotting, immunoutfällning och immunfärgningstekniker. På grund av sin ringa storlek är det osannolikt att de påverkar det taggade proteinets biokemiska egenskaper. En mängd olika plasmider innehåller DNA som kodar för en amino-terminal tag bestående av sex histidinrester (6xHis) följt av ett utökat multipla kloningsställe. 6xHis-taggen på de uttryckta rekombinanta proteinerna möjliggör effektiv koppling till Ni2+ affinitetshartser och rening med ett enda steg

Ansökan

För att säkerställa optimal analysprestanda rekommenderar AREX att man utför reagenstitrering skräddarsydd för varje testsystem för optimala detekteringsresultat.

WB	1:1000-1:2000
IF/ICC	1:800-1:2000
FC	1:200-1:1000
IP	1:50

*Resultaten är provspecifika. Se dina lokala analysförhållanden och testparametrar för referens.

Översikt

Beskrivning	Kanin monoklonal antikropp mot hans tagg
Antikroppstyp	Primär antikropp
Förutspådd MW	Beroende på kundernas intressemål
Immunogen	Syntetisk peptid: HHHHHH (6X His) konjugerad till KLH.
Rening	ProA-affinitetsrenat IgG
Form/buffert	PBS 59 %, Natriumazid 0,01 %, Glycerol 40 %, BSA 0,71 %.
Alternativa namn	6 Hans epitoptagg; Hexa His tag; HHHHHH epitoptagg; HHHHHH tag; Hans tagg

*AREX optimerar kontinuerligt våra produkter. Webbsidans innehåll kanske inte återspeglar de senaste uppdateringarna. För frågor, vänligen kontakta info@arexbio.com eller din lokala distributör.
*Klonnummer, reaktivitet, källa/värd och klonalitet finns i avsnittet produktnamn och nyckelfunktioner ovan.

Data

Alla banor: Anti-His-tag-antikropp vid 1:2 000 utspädning
Observerad MW: Beror på fusionsproteinet med His-taggen

Spår 1: fusionsprotein med N-terminal 6X His-tagg
Spår 2: fusionsprotein med C-terminal 6X His-tagg
Bana 3: Multi-tag-fusionsprotein innehållande 6X His-tag
Bana 4: 293-celler lysat-transfekterad med N-terminal 6X His-märkt gen
Bana 5: 293-celler lysat-transfekterad med C-terminal 6X His-märkt gen
Spår 6: fusionsprotein med N-terminal 6X His-tagg
Spår 7: fusionsprotein med C-terminal 6X His-tagg
Spår 8: otransfekterat 293-cellysat

Lysat vid 20 µg per bana
2:a Ab:
GAR HRP(H+L) 1:5 000
Exponering: 60-tal

Överlagringshistogram som visar 293 celler transfekterade med N-terminal (blå) och C-terminal (röd) 6X His-märkt gen färgad med ARA796. Cellerna inkuberades sedan i antikroppen (ARA796, 1:1 000 spädning) i 1 x PBS/1 % BSA under 30 minuter vid rumstemperatur. Den sekundära antikroppen som användes var en Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor^® 488 (IgG H+L) vid 1:2 000 utspädning under 20 minuter vid rumstemperatur. Omärkt prov (svart) användes som kontroll.

ARA796 färgade 293-celler transfekterade med N-terminal 6X His-märkt gen med IF/ICC (immunofluorescens/immunocytokemi). Celler fixerades med paraformaldehyd, permeabiliserades med 0,1 % Triton X-100 och blockerades med 10 % getserum under en halvtimme vid rumstemperatur. Prover inkuberades med primär antikropp (1:10 000) vid 4°C. En Alexa Fluor^® 488-konjugerad Goat Anti-Rabbit IgG polyklonal användes som den sekundära antikroppen (1:500). DAPI (blå) användes som den nukleära motfärgningen.

Kontroll: PBS och sekundär antikropp, An Alexa Fluor^® 488-konjugerad Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

ARA796 färgade 293-celler transfekterade med C-terminal 6X His-märkt gen genom IF/ICC (immunofluorescens/immunocytokemi). Celler fixerades med paraformaldehyd, permeabiliserades med 0,1 % Triton X-100 och blockerades med 10 % getserum under en halvtimme vid rumstemperatur. Prover inkuberades med primär antikropp (1:800) vid 4°C. En Alexa Fluor^® 488-konjugerad Goat Anti-Rabbit IgG polyklonal användes som den sekundära antikroppen (1:500). DAPI (blå) användes som den nukleära motfärgningen.

Kontroll: PBS och sekundär antikropp, An Alexa Fluor^® 488-konjugerad Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Hans tag immunutfälldes från 0,05 mg av 293 helcellslysat transfekterat med N-terminal 6X His-märkt gen med ARA796 vid 1:50 utspädning.
2:a Ab: GAR HRP för IP 1:500

Bana 1: ARA796 IP i 293 helcellslysat transfekterat med N-terminal 6X His-märkt gen
Bana 2: PBS istället för ARA796 i 293 helcellslysat transfekterat med N-terminal 6X His-märkt gen
Bana 3: 293 helcellslysat transfekterat med N-terminal 6X His-märkt gen, 10 µg (ingång)
Exponering: 20s

Hans tag immunutfälldes från 0,2 mg av 293 helcellslysat transfekterat med C-terminal 6X His-märkt gen med ARA796 vid 1:50 utspädning.
2:a Ab:
GAR HRP för IP 1:500
Bana 1: ARA796 IP i 293 helcellslysat transfekterat med C-terminal 6X His-märkt gen
Bana 2: PBS istället för ARA796 i 293 helcellslysat transfekterat med C-terminal 6X His-märkt gen
Bana 3: 293 helcellslysat transfekterat med C-terminal 6X His-märkt gen, 10 µg (ingång)
Exponering: 120s

Förvaring

Förvaras vid 4°C kortvarigt. För långtidsförvaring, förvara vid -20°C, undvik frys-/upptiningscykler.

Obs

Endast för forskningsanvändning. Inte för diagnostisk, terapeutisk, profylaktisk eller in vivo användning.

Vanliga frågor

Vilka är huvudtyperna av forskningsantikroppar och hur skiljer de sig åt?

Forskningsantikroppar delas huvudsakligen in i monoklonala antikroppar och polyklonala antikroppar. Monoklonala antikroppar erbjuder vanligtvis högre specificitet och bättre batch-to-batch-konsistens, medan polyklonala antikroppar ofta ger starkare affinitet men kan visa mer variation mellan batcherna. Valet beror på dina specifika experimentella behov.

Hur vet jag om en forskningsantikropp är lämplig för mitt experiment?

Det rekommenderas att noggrant granska produktdatabladet för validerade tillämpningar, artreaktivitet, rekommenderade spädningar och publicerade referenser. För nya antikroppar är det vanligtvis till hjälp att utföra en liten validering med positiva kontrollprover.

Kan felaktig förvaring av forskningsantikroppar påverka experimentella resultat?

Ja. Antikroppar är känsliga för temperatur, upprepade fryscykler och kontaminering. Felaktig lagring kan leda till minskad aktivitet, ökad bakgrund eller svagare signaler. Det är bäst att följa förvaringsinstruktionerna i produktdatabladet.

Varför fungerar inte den rekommenderade utspädningen i databladet bra i mitt experiment?

Den rekommenderade utspädningen baseras på leverantörens testförhållanden. Faktorer som provtyp, fixeringsmetod och detektionssystem i ditt labb kan påverka den optimala arbetskoncentrationen. Att utföra en utspädningsserieoptimering i ditt eget system är ofta nödvändigt.

Vilka försiktighetsåtgärder ska jag vidta när jag använder en nyinköpt forskningsantikropp för första gången?

Det är lämpligt att kort centrifugera antikroppen (särskilt koncentrerade eller lyofiliserade sådana), och sedan utföra ett småskaligt pilotexperiment med de rekommenderade förhållandena. Att registrera batchnummer och användningsdatum är också användbart för framtida spårning.

Nya produkter

Antigenåtervinningslösning II (EDTA)

Antigenåtervinningslösning I (citrat)

Hyaluronsyra ELISA Kit

Human FADS2 ELISA Kit

AREX® Fluor 488 Rabbit IgG (H&L) Donkey Polyclonal Antibody

AREX® Fluor 488 Rabbit IgG (H&L) Åsna polyklonal antikropp

AREX® Fluor 647 Mouse IgG (H+L) F(ab')2 Fragment Donkey Polyclonal Antibody

AREX® Fluor 647 Mus IgG (H+L) F(ab')2 Fragment Åsna polyklonal antikropp