Kit ELISA CD28 humano
GATO.NÃO. : AEH0183
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Plano de fundo
CD28 e CTLA-4, juntamente com seus ligantes, B7-1 e B7-2, constituem uma das vias coestimulatórias dominantes que regulam as respostas das células T e B. CD28 e CTLA-4 são moléculas estruturalmente homólogas que são membros da superfamília do gene da imunoglobulina (Ig). Tanto o CD28 quanto o CTLA-4 são compostos por um único Ig
Domínio extracelular semelhante a V, um domínio transmembrana e um domínio intracelular. CD28 e CTLA-4 são ambos expressos na superfície celular como homodímeros ligados por dissulfeto ou como monômeros. Os genes que codificam estas duas moléculas estão intimamente ligados no cromossoma 2 humano e no cromossoma 1 do ratinho. O CD28 do ratinho é expresso constitutivamente em virtualmente 100% das células T do ratinho e nos timócitos em desenvolvimento. A expressão da superfície celular do CD28 de camundongo é regulada negativamente após a ligação do CD28 na presença de PMA ou PHA. Em contraste, CTLA-4 não é expresso constitutivamente, mas é regulado positivamente rapidamente após ativação de células T e ligação de CD28. A expressão da superfície celular do CTLA - 4 de camundongo atinge o pico aproximadamente 48 horas após a ativação. Embora CTLA-4 e CD28 possam se ligar aos mesmos ligantes, CTLA-4 se liga a B7-1 e B7-2 com uma afinidade 20-100 vezes maior que CD28. Foi demonstrado que a interação CD28/B7 previne a apoptose de células T ativadas através da regulação positiva de Bcl-xL. A ligação de CD28 também demonstrou regular a diferenciação Th1/Th2.
Domínio extracelular semelhante a V, um domínio transmembrana e um domínio intracelular. CD28 e CTLA-4 são ambos expressos na superfície celular como homodímeros ligados por dissulfeto ou como monômeros. Os genes que codificam estas duas moléculas estão intimamente ligados no cromossoma 2 humano e no cromossoma 1 do ratinho. O CD28 do ratinho é expresso constitutivamente em virtualmente 100% das células T do ratinho e nos timócitos em desenvolvimento. A expressão da superfície celular do CD28 de camundongo é regulada negativamente após a ligação do CD28 na presença de PMA ou PHA. Em contraste, CTLA-4 não é expresso constitutivamente, mas é regulado positivamente rapidamente após ativação de células T e ligação de CD28. A expressão da superfície celular do CTLA - 4 de camundongo atinge o pico aproximadamente 48 horas após a ativação. Embora CTLA-4 e CD28 possam se ligar aos mesmos ligantes, CTLA-4 se liga a B7-1 e B7-2 com uma afinidade 20-100 vezes maior que CD28. Foi demonstrado que a interação CD28/B7 previne a apoptose de células T ativadas através da regulação positiva de Bcl-xL. A ligação de CD28 também demonstrou regular a diferenciação Th1/Th2.
Dados típicos
|
pg/ml |
OD |
Média |
Corrigido |
|
|
0.00 |
0.0102 |
0.0092 |
0.0097 |
|
|
156.25 |
0.0309 |
0.0313 |
0.0311 |
0.0214 |
|
312.50 |
0.0496 |
0.0578 |
0.0537 |
0.0440 |
|
625.00 |
0.0966 |
0.1092 |
0.1029 |
0.0932 |
|
1250.00 |
0.2040 |
0.2336 |
0.2188 |
0.2091 |
|
2500.00 |
0.5139 |
0.5597 |
0.5368 |
0.5271 |
|
5000.00 |
1.3250 |
1.5090 |
1.4170 |
1.4073 |
|
10000.00 |
3.3340 |
3.5900 |
3.4620 |
3.4523 |
Precisão
|
Precisão intra-ensaio |
Precisão Inter-ensaio |
|||||
|
Número da amostra |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Média (pg/ml) |
203.4 |
1052.0 |
3276.1 |
166.4 |
957.1 |
3088.7 |
|
Desvio Padrão |
11.5 |
37.4 |
176.2 |
3.5 |
29.7 |
91.4 |
|
Coeficiente de Variação (%) |
5.6 |
3.6 |
5.4 |
2.1 |
3.1 |
3.0 |
Spike Re
A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de CD28 humano em amostras de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência.
A recuperação variou de 85% a 113%, com uma recuperação média global de 103%.
A recuperação variou de 85% a 113%, com uma recuperação média global de 103%.
Valores de amostra
| Matriz de Amostra | Amostra avaliada | Faixa (pg/ml) | Detectável (%) | Média de detectável (pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| Soro | 30 | 3,32-816,93 | 100 | 104.41 |
Soro/Plasma – Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis foram avaliadas quanto à presença de CD28 neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.
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