Cromógeno ARExVisual® DAB (20×)
Principais recursos e detalhes
- Formato: Líquido Transparente
- Aplicação: IHC
- Armazenar em 2 - 8°C
- Os usuários devem ser treinados na técnica IHC antes
-
Marca:
GATO.NÃO. : ARB0002
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Detalhes do produto
Plano de fundo
3,3'diaminobenzidina (DAB) é um cromógeno amplamente utilizado para coloração imuno-histoquímica. Quando na presença da enzima peroxidase, o DAB produz um precipitado marrom insolúvel em álcool. Este kit pode produzir coloração DAB mais sensível e mais escura com contraste superior entre o cromógeno e a contracoloração de hematoxilina. A diluição de trabalho padrão é de 50 μL de cromogênio DAB por 1 mL de tampão DAB, embora a proporção possa ser ajustada conforme desejado. Maior sensibilidade pode ser alcançada usando mais cromogênio DAB versus tampão DAB, o cromógeno DAB máximo pode ser usado como 70 μL em 1 mL de tampão DAB.
Aplicação
Imunohistoquímica para tecidos congelados e embebidos em parafina.
Uso pretendido
Este cromogênio DAB produzirá um depósito de cor marrom após reação com peroxidase no local do antígeno alvo. É adequado para uso em peroxidase - métodos de coloração imuno-histoquímica baseados.
Armazenamento e estabilidade
Armazenar em 2 - 8°C. Não congele. Voltar para 2 - 8°C imediatamente após o uso. Não armazene nem realize coloração sob luz forte, como luz solar direta. Verifique a data de validade no frasco. Não utilize os reagentes se as datas de validade indicadas no rótulo tiverem expirado. Não utilizar se os reagentes ficarem turvos. Não misture reagentes de lotes diferentes.
Prepare a solução de trabalho DAB
Adicione uma gota ou 50 μL de cromogênio DAB (20x concentrado) em 1mL de tampão DAB (1x). O usuário pode fazer qualquer quantidade de solução de trabalho DAB usando a mesma proporção (1:20). Use dentro de 2 horas após a preparação. A sensibilidade máxima pode ser alcançada usando 80 μL de cromogênio DAB com 1mL de tampão.
Aplique solução de trabalho DAB suficiente para cobrir completamente a amostra. Incubar 5 - 10 minutos. Monitore o desenvolvimento da cor sob microscópio óptico. Enxaguar as lâminas suavemente com água destilada. Contracoloração, limpeza e montagem em meio de montagem apropriado.
Aplique solução de trabalho DAB suficiente para cobrir completamente a amostra. Incubar 5 - 10 minutos. Monitore o desenvolvimento da cor sob microscópio óptico. Enxaguar as lâminas suavemente com água destilada. Contracoloração, limpeza e montagem em meio de montagem apropriado.
Notas
1.A solução de trabalho DAB é leve - confidencial. Antes de aplicar a solução de trabalho DAB no tecido, mantenha-o no escuro. Para o desenvolvimento da cor, incube a amostra longe de luz forte, de preferência no escuro.
2.Hemoglobina, mioglobina, citocromo, catalase, neutrófilos, monócitos e eosinófilos podem conter atividade endógena de peroxidase ou pseudoperoxidase, o que pode trazer falsa - resultados positivos. Mesmo tratada com reagente bloqueador de peroxidase, a coloração avermelhada - o pigmento marrom das bemoproteínas ainda pode existir. As lâminas de controlo são necessárias para uma interpretação adequada de cada conjunto de resultados de coloração de amostras: controlo de tecido positivo, controlo de tecido negativo e controlo de reagente negativo (lâmina tratada com controlo de isotipo em vez de anticorpo primário).
2.Hemoglobina, mioglobina, citocromo, catalase, neutrófilos, monócitos e eosinófilos podem conter atividade endógena de peroxidase ou pseudoperoxidase, o que pode trazer falsa - resultados positivos. Mesmo tratada com reagente bloqueador de peroxidase, a coloração avermelhada - o pigmento marrom das bemoproteínas ainda pode existir. As lâminas de controlo são necessárias para uma interpretação adequada de cada conjunto de resultados de coloração de amostras: controlo de tecido positivo, controlo de tecido negativo e controlo de reagente negativo (lâmina tratada com controlo de isotipo em vez de anticorpo primário).
Advertências e precauções
1. Use equipamento de proteção individual adequado para evitar contato com os olhos e a pele.
2. As amostras, antes ou depois da fixação, e todos os materiais a elas expostos, devem ser manuseados como se fossem infecciosos e eliminados com as devidas precauções.
3. Não substitua reagentes de outros números de lote ou de kits de outros fabricantes.
4. Os tempos ou temperaturas de incubação diferentes dos recomendados devem ser validados pelo usuário.
5. A solução não utilizada deve ser eliminada de acordo com os regulamentos locais.
2. As amostras, antes ou depois da fixação, e todos os materiais a elas expostos, devem ser manuseados como se fossem infecciosos e eliminados com as devidas precauções.
3. Não substitua reagentes de outros números de lote ou de kits de outros fabricantes.
4. Os tempos ou temperaturas de incubação diferentes dos recomendados devem ser validados pelo usuário.
5. A solução não utilizada deve ser eliminada de acordo com os regulamentos locais.
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