Anticorpo policlonal de coelho alfa HIF1

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para HIF1 alfa

Alvo: HIF1 alfa
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato, Bovino, Cachorro
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA08630

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Funciona como um regulador transcricional mestre da resposta adaptativa à hipóxia. Sob condições hipóxicas, ativa a transcrição de mais de 40 genes, incluindo eritropoietina, transportadores de glicose, enzimas glicolíticas, fator de crescimento endotelial vascular, HILPDA e outros genes cujos produtos proteicos aumentam o fornecimento de oxigênio ou facilitam a adaptação metabólica à hipóxia. Desempenha um papel essencial na vascularização embrionária, na angiogênese tumoral e na fisiopatologia da doença isquêmica. Heterodimeriza com ARNT; "O heterodímero se liga à sequência central de DNA 5'-TACGTG-3' dentro do elemento de resposta à hipóxia (HRE) dos promotores do gene alvo" . A ativação requer o recrutamento de coativadores transcricionais como CREBBP e EP300. A actividade é melhorada pela interacção com NCOA1 e/ou NCOA2.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:100
SE/ICC	1:50 - 1:200

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para HIF1 alfa
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína alfa HIF1.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Peptídeo sintético conjugado com KLH - abrangendo uma sequência dentro da região central do HIF1 alfa humano. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 92 kD; Observado: 120; 93kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	BHLHE78; MOP1; PASD8; Hipóxia-fator indutível 1-alfa; HIF-1-alfa; HIF1-alfa; ARNT-proteína interagente; Básico-hélice-loop-hélice-proteína PAS MOP1; proteína básica hélice - alça - hélice Classe E 78; bHLHe78; Membro da proteína PAS 1; Domínio PAS - contendo proteína 8
Símbolo Genético	HIF1A
Gene Entrez	3091 (Humano); 15251(Rato); 29560 (Rato)
SwissProt	Q16665(Humano); Q61221(Rato); O35800(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de HIF1 alfa em lisados de células inteiras HEK293T (A), A549 (B), MCF7 (C), H9C2 (D), SP20 (E). (Tamanho de banda previsto: 92 kD; Tamanho de banda observado: 120; 93 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração alfa de HIF1 em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de cérebro humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração alfa de HIF1 em células LO2. Células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS por 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% por 30 minutos em temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 488 -(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro. Faloidina - AREX® Fluor 594 foi usado para colorir os filamentos de actina (vermelho). DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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