c-Met (Phospho-Y1349) Anticorpo Policlonal de Coelho

Ficha técnica

FISPQ

c-Met (Phospho-Y1349) Rabbit Polyclonal Antibody

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para c-Met (Phospho-Y1349)

Alvo: c-Met (Fósforo-Y1349)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato, Bovino, Porco
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA09730

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Receptor tirosina quinase que transduz sinais da matriz extracelular para o citoplasma ligando-se ao fator de crescimento de hepatócitos/ligante HGF. Regula muitos processos fisiológicos, incluindo proliferação, dispersão, morfogênese e sobrevivência. A ligação do ligante na superfície celular induz a autofosforilação do MET no seu domínio intracelular que fornece locais de ancoragem para moléculas de sinalização a jusante. Após a ativação pelo ligante, interage com a subunidade PI3 - quinase PIK3R1, PLCG1, SRC, GRB2, STAT3 ou o adaptador GAB1. O recrutamento desses efetores a jusante pelo MET leva à ativação de várias cascatas de sinalização, incluindo RAS-ERK, PI3 quinase-AKT ou PLCgamma-PKC.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:100
SE/ICC	1:50 - 1:200

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para c-Met (Phospho-Y1349)
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína c-Met somente quando fosforilada em Y1349.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Fosfopéptido sintético conjugado com KLH-correspondente aos resíduos que rodeiam Y1349 da proteína c-Met humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 155 kD; Observado: 145; 170 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	Receptor do fator de crescimento de hepatócitos; receptor de HGF; receptor HGF/SF; Proto-oncogene c-Met; Receptor do fator de dispersão; receptor SF; Tirosina-proteína quinase Met
Símbolo Genético	ATINGIDO
Gene Entrez	4233(Humano); 24553 (Rato)
SwissProt	P08581(Humano); P16056(Rato); P97523(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de c-Met (Phospho-Y1349) em lisados de células inteiras CT26 (A), fígado de rato (B), HEK293T (C), LO2 (D). (Tamanho de banda previsto: 155 kD; Tamanho de banda observado: 145; 170 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração c - Met (Phospho - Y1349) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer colorretal humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente de coloração c-Met (Phospho-Y1349) em células LO2. Células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS por 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% por 30 minutos em temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 488 -(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro. Faloidina - AREX® Fluor 594 foi usado para colorir os filamentos de actina (vermelho). DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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