엑소좀 추출 및 정제 키트(혈청-혈장)

엑소좀은 세포에서 분비되는 RNA와 단백질을 포함하는 작은 소포(30-150 nm)로 혈청/혈장에 풍부합니다. 엑소좀은 특정 세포 사이에 효과기나 신호 분자를 전달하는 세포간 전달자 역할을 하는 것으로 간주됩니다.

엑소좀의 생물학적 기능 연구에서는 완전한 입자를 분리하는 것이 필요합니다. 유미바이오스가 독자적으로 개발한 혈청/혈장 엑소좀 고속 추출 키트는 성분 최적화 후 혈청/혈장 내 엑소좀 추출에 적합한 키트입니다. 취득하는데 도움이 됩니다 높은-순도 엑소솜 입자 빠르고 효율적으로.

고속 원심분리기(회전 속도 최대 12000rpm), 와류 발진기; 1.5 mL 원심분리관, PBS 완충액, 제빙기.

* 뉴클레아제-무료, 멸균

• · 세포 상등액, 조직, 소변, 혈청, 혈장, 우유 등을 포괄합니다.
• · 유사한 제품에 비해 최대 5배 높은 시료 처리 능력.
• · 엑소좀은 세포 공동 배양 및 오믹스 연구에 사용될 수 있습니다.
• · 연구개발을 위한 엑소좀 키트의 지속적인 최적화에 전념합니다.
• · 300명이 넘는 고객의 신뢰를 받아 안심하고 구매하고 사용할 수 있습니다.
• · 비용을 절감하면서 대규모 연구를 지원하는 데 비용효과적입니다.

I. 샘플 전처리

1. 원심분리기는 사용 전 4℃에서 10분간 예냉하여야 한다.

2. 샘플링: 냉동 샘플의 경우 냉장고에서 꺼낸 후 2-8℃에서 해동합니다. 신선한 샘플의 경우 수집 후 2-8℃에 보관하십시오.

3. 시료를 500μL/tube에 맞춰 소포장하고, 부족한 부분을 1×PBS로 500μL로 보충한다.

II 불순물 단백질 제거

1. 테이크 아웃 후 솔루션 A 키트에서 꺼내어 냉장고 냉동실 층에 최소 1시간 동안 넣어두세요. 꺼내다 용액 A를 미리 냉각시킨 후 얼음 위에 놓습니다.;

2. 추가 솔루션 A: 400μL 추가 사전-냉각된 솔루션 A 500μL 혈액 샘플을 넣고 즉시 원심분리관을 단단히 덮은 다음 볼텍스 진동기를 사용하여 30초 동안 완전히 혼합합니다.

3. 단백질 제거를 위한 원심분리: 균일하게 혼합된 시료를 4℃, 12000 rpm에서 20분간 원심분리하여 시료 중의 불순한 단백질을 제거합니다.

4. 상등액 옮기기: 불순한 단백질이 제거된 원심분리 상등액을 새로운 1.5mL 원심관에 옮긴다.

III 엑소좀 추출

1. 추가 솔루션 B: 120 추가μL 솔루션 B 불순한 단백질이 제거된 원심분리된 상층액에 넣습니다.

2. 용액 혼합: 첨가 후 솔루션 B, 원심분리 튜브를 단단히 덮고 와류 발진기를 사용하여 2분 동안 완전히 혼합합니다. 그런 다음 실온에서 5분간 방치합니다.

3. 엑소좀 침전: 혼합액이 담긴 원심분리관을 4℃, 12000 rpm에서 15분간 원심분리한 후 상층액을 버린다.

4. 다시 원심분리: 원심분리관을 4℃, 12000 rpm에서 2분간 침전시킨 후 상층액을 버린다. (참고: 상등액은 최대한 빨아들여야 합니다). 1.5 mL 원심분리 튜브를 실온에서 열어 둡니다. ~을 위한 10분;

5. 엑소좀 재현탁: 1×PBS 200μL를 취하고 원심분리된 침전물을 고르게 회전시킵니다. 용해된 후 재현탁된 용액을 새로운 1.5mL 원심분리 튜브로 옮깁니다.

6. 엑소좀 입자 획득: 1.5 mL 원심분리 튜브에 재현탁 용액을 담아 4℃, 12000 rpm에서 2분간 원심분리하고 상청액을 보관합니다. 이 상청액은 엑소좀 입자가 풍부합니다.

(참고: 이 시점에서 다량의 침전물이 있을 수 있으며 이는 정상적인 현상입니다.)

IV 엑소좀 정제

1. 엑소좀 정제: 획득된 엑소좀 입자의 조생성물을 엑소좀 정제 필터의 상부 챔버로 이송합니다(EPF 컬럼) 4℃, 5600rpm에서 20분간 원심분리한다. 원심분리 후 EPF 컬럼 하단에 있는 용액을 수집합니다. 이 액체는 정제된 엑소좀 입자입니다. (참고: EPF 컬럼은 재사용할 수 없습니다.)

2. 엑소좀 보관: 정제된 엑소좀을 50-100μL로 서브팩하고 후속 실험용으로 -80℃ 저온 냉장고에 보관해야 합니다.

V 보관 조건

제품 수령 후 시약은 별도로 보관해 주세요. 사용 전 충분히 섞어주세요.

솔루션 A: 실온에서 운송하고 키트 개봉 후 -18℃에서 보관합니다(기존 냉장고의 냉동고 층).

용액 B: 실온에서 보관;

EPF 컬럼: 실온에서 보관;

Ⅴ 주의사항

이 제품은 생명 과학 연구 전용입니다!

VI 기타 항목

더 많은 기술적인 질문이 있는 경우 Umibio에 문의하여 추가 답변을 받으세요.