Anticorpo monoclonale murino ZAP70 (C3786)

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo monoclonale murino anti-ZAP70

Obiettivo: ZAP70
Fonte/Ospite: Topo
Reattività: Umano, topo
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB, SE/ICC, FC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : AMA03398

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Tirosina chinasi che svolge un ruolo essenziale nella regolazione della risposta immunitaria adattativa. Regola la motilità, l'adesione e l'espressione delle citochine delle cellule T mature, nonché lo sviluppo dei timociti. Contribuisce anche allo sviluppo e all'attivazione dei linfociti B-primari. Quando le cellule presentanti l'antigene (APC) attivano il recettore delle cellule T (TCR), una serie di fosforilazioni portano al reclutamento di ZAP70 nei componenti fosforilati del TCR CD3E e CD247/CD3Z attraverso il motivo ITAM sulla membrana plasmatica attivano il recettore delle cellule T (TCR), una serie di fosforilazioni portano al reclutamento di ZAP70 nei componenti fosforilati del TCR CD3E e CD247/CD3Z attraverso il motivo ITAM alla membrana plasmatica.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
SE/ICC	1:10 - 1:50
FC	1:10 - 1:50

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo monoclonale murino anti-ZAP70
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina ZAP70.
Tipo di anticorpo	Anticorpo primario
Immunogeno	Proteina di fusione ricombinante di ZAP70 umano. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	Questo anticorpo viene purificato attraverso una colonna di proteina G.
Peso Molecolare	Previsto: 69 kD; Osservato: 70 kD
Modulo/Buffer	IgG2a kappa di topo. Liquido in PBS, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% sodio azide.
Nomi alternativi	SRK; Tirosina-proteina chinasi ZAP-70; proteina associata alla catena zeta-70 kDa; Tirosina chinasi correlata a Syk-
Simbolo del gene	ZAP70
Entrez Gene	7535(Umano); 22637(Topo)
SwissProt	P43403(Umano); P43404(Topo)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di ZAP70 nei lisati di cellule intere di Jurkat (A), MOLT4 (B), timo di topo (C). (Dimensione della banda prevista: 69 kD; Dimensione della banda osservata: 70 kD)

Analisi immunofluorescente della colorazione ZAP70 nelle cellule Hela. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera umidificata. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 555 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Analisi citofluorimetrica delle cellule Jurkat utilizzando l'anticorpo Anti-ZAP70. Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 2% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con metanolo al 90% per 10 minuti. Le cellule sono state incubate in albumina di siero bovino al 2% per bloccare le interazioni proteina-proteina non specifiche seguite dall'anticorpo a 37 °C per 60 minuti. L'anticorpo secondario Goat Anti-Mouse IgG (H&L) - AREX® Fluor 488 è stato incubato a 37 °C per 40 minuti. L'anticorpo di controllo dell'isotipo (linea blu) è stato utilizzato nelle stesse condizioni.

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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