Anticorpo monoclonale di coniglio vimentina (ARA732)

Caratteristiche principali e dettagli

  • Obiettivo: Vimentina
  • Fonte/Ospite: Coniglio
  • Reattività: Umano, topo, ratto
  • Clonalità: Monoclonale
  • Applicazioni: WB,IHC,FC,IF/ICC,IP
  • Coniugazione: Non coniugato
  • Stoccaggio: a-20°C
  • Marca:
Dettagli del prodotto
Sfondo
Le vimentine sono filamenti intermedi di classe-III presenti in varie cellule non-epiteliali, in particolare nelle cellule mesenchimali. La vimentina è attaccata al nucleo, al reticolo endoplasmatico e ai mitocondri, sia lateralmente che terminalmente. Svolge un ruolo nel movimento direzionale delle cellule, nell'orientamento, nell'organizzazione dello strato cellulare e nella polarizzazione del complesso di Golgi sul fronte della migrazione cellulare. Protegge SCRIB dalla degradazione proteasomale e facilita la sua localizzazione nei filamenti intermedi in modo mediato dal contatto cellulare. Può promuovere la crescita degli assoni e la riparazione delle fibre motorie tramite il reclutamento mediato da DSP alle punte di crescita.
Applicazione
Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB

1:5000-1:10000

IHC

1:100-1:200

SE/ICC

1:2000-1:10000

FC

1:10-1:200

IP

1:20

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.
Panoramica

Descrizione

Anticorpo monoclonale di coniglio contro la vimentina

Tipo di anticorpi

Anticorpo primario

MW previsto

54kDa

Immunogeno

Come immunogeno è stato utilizzato un peptide sintetico corrispondente ai residui sul terminale C-terminale della vimentina umana.

Purificazione

IgG purificate per affinità ProA

Modulo/Buffer

PBS 59%, Sodio azide 0,01%, Glicerolo 40%, BSA 0,07%.

Nomi alternativi

Vimentina

Simbolo del gene

VIM

Entrez Gene

7431(Umano)

Swissprot

P08670

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.
Dati

Tutte le corsie: anticorpo anti-vimentina alla diluizione 1:5.000
MW previsto: 54 kDa
MW osservato: 54 kDa

Corsia 1: Hela
Corsia 2: HEK293
Corsia 3: A549
Corsia 4: 3T3

Lisato a 10 μg per corsia
2° Ab:
G&R HRP(H+L) 1:10.000

Esposizione: 100 secondi

Tutte le corsie: anticorpo anti-vimentina alla diluizione 1:5.000
MW previsto: 54 kDa
MW osservato: 54 kDa

Corsia 1: Mu Cuore
Corsia 2: Cuore di ratto

Lisato a 10 μg per corsia
2° Ab:
G&R HRP(H+L) 1:10.000

Esposizione: 20s

Analisi immunoistochimica (formalina/PFA-paraffina fissa-sezioni incluse) del tessuto del colon umano marcante vimentina con ARA732 a 1:100. Il recupero dell'antigene mediato dal calore è stato eseguito utilizzando il tampone Tris/EDTA a pH 9,0.

Istogramma sovrapposto che mostra le cellule Hela colorate con ARA732 (blu). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 4% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con TritonX-100 allo 0,1% per 15 minuti. Le cellule sono state quindi incubate nell'anticorpo (ARA732, diluizione 1:10) in 1x PBS/1% BSA per 30 minuti a 4°C. L'anticorpo secondario utilizzato era un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) alla diluizione 1:2.000 per 20 minuti a 4°C. Come controllo è stato utilizzato un campione senza etichetta (rosso).

Colorazione ARA732 con vimentina nelle cellule Hela mediante IF/ICC (immunofluorescenza/immunocitochimica). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide, permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% e bloccate con siero di capra al 10% per mezz'ora a temperatura ambiente. I campioni sono stati incubati con l'anticorpo primario (1:2.000) a 4°C. Un anticorpo policlonale di capra anti-coniglio coniugato con Alexa Fluor® 488-è stato utilizzato come anticorpo secondario (1:500). DAPI (blu) è stato utilizzato come controcolorante nucleare.
Controllo: PBS e anticorpo secondario, un anticorpo di capra-IgG di coniglio coniugato con Alexa Fluor® 488-(1:500).

La vimentina è stata immunoprecipitata da 0,4 mg di lisato Hela con ARA732 alla diluizione 1:20.
2° Ab:
GAR HRP per IP 1:500
Corsia 1: ARA732 IP nel lisato di cellule intere Hela
Corsia 2: IgG di coniglio invece di ARA732 nel lisato di cellule intere Hela
Corsia 3: lisato di cellule intere Hela, 10 μg (input)
Esposizione: anni '60

Stoccaggio
Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.
Nota
Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.
Domande frequenti
Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?
Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.
Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?
Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.
La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?
SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.
Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?
La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.
Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?
Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.
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