Buffer DAB ARExVisual®
Caratteristiche principali e dettagli
- Formato: liquido trasparente
- Applicazione: IHC
- Negozio a 2 - 8°C
- Gli utenti devono essere precedentemente formati sulla tecnica IHC
-
Marca:
N. CAT. :ARB0003
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Dettagli del prodotto
Sfondo
La 3,3' diaminobenzidina (DAB) è un cromogeno ampiamente utilizzato per la colorazione immunoistochimica. Quando è in presenza dell'enzima perossidasi, il DAB produce un precipitato marrone insolubile in alcol. Questo kit può produrre una colorazione DAB più sensibile e più scura con un contrasto superiore tra la controcolorazione cromogena ed ematossilina. La diluizione di lavoro standard è 50 μL di cromogeno DAB per 1 ml di tampone DAB, sebbene il rapporto possa essere regolato come desiderato. È possibile ottenere una sensibilità più elevata utilizzando più cromogeno DAB rispetto al tampone DAB, il cromogeno DAB massimo può essere utilizzato come 70 μL in 1 ml di tampone DAB.
Applicazione
Immunoistochimica per tessuti congelati e inclusi in paraffina.
Uso previsto
Questo cromogeno DAB produrrà un deposito di colore marrone in seguito alla reazione con la perossidasi nel sito dell'antigene bersaglio. È adatto per l'uso nella perossidasi - metodi di colorazione immunoistochimica basati.
Conservazione e stabilità
Negozio a 2 - 8°C. Non congelare. Ritorna a 2 - 8°C immediatamente dopo l'uso. Non conservare o eseguire la colorazione sotto una luce forte, come la luce solare diretta. Controllare la data di scadenza sulla bottiglia. Non utilizzare i reagenti se sono trascorse le date di scadenza riportate sull'etichetta. Non utilizzare se i reagenti diventano torbidi. Non mescolare i reagenti di lotti diversi.
Preparare la soluzione di lavoro DAB
Aggiungere una goccia o 50 μL di cromogeno DAB (concentrato 20x) in 1 ml di tampone DAB (1x). L'utente può preparare qualsiasi quantità di soluzione di lavoro DAB utilizzando lo stesso rapporto (1:20). Utilizzare entro 2 ore dalla preparazione. La sensibilità massima può essere raggiunta se si utilizzano 80 μL di cromogeno DAB con 1 ml di tampone.
Applicare una quantità sufficiente di soluzione di lavoro DAB per coprire completamente il campione. Incubare 5 - 10 minuti. Monitorare lo sviluppo del colore al microscopio ottico. Sciacquare delicatamente i vetrini con acqua distillata. Controcolorare, schiarire e montare in un mezzo di montaggio appropriato.
Applicare una quantità sufficiente di soluzione di lavoro DAB per coprire completamente il campione. Incubare 5 - 10 minuti. Monitorare lo sviluppo del colore al microscopio ottico. Sciacquare delicatamente i vetrini con acqua distillata. Controcolorare, schiarire e montare in un mezzo di montaggio appropriato.
Note
1.La soluzione di lavoro DAB è leggera - sensibile. Prima di applicare la soluzione di lavoro DAB sul tessuto, mantenerlo al buio. Per lo sviluppo del colore, incubare il campione lontano dalla luce intensa, preferibilmente al buio.
2.L'emoglobina, la mioglobina, il citocromo, la catalasi, i neutrofili, i monociti e gli eosinofili possono contenere attività di perossidasi o pseudoperossidasi endogena, che può portare a falsi - risultati positivi. Anche trattato con il reagente bloccante la perossidasi, il rossastro - il pigmento marrone delle bemoproteine potrebbe ancora esistere. I vetrini di controllo sono necessari per la corretta interpretazione di ogni serie di risultati della colorazione dei campioni: controllo positivo del tessuto, controllo negativo del tessuto e controllo negativo del reagente (diapositivo trattato con controllo isotipico al posto dell'anticorpo primario).
2.L'emoglobina, la mioglobina, il citocromo, la catalasi, i neutrofili, i monociti e gli eosinofili possono contenere attività di perossidasi o pseudoperossidasi endogena, che può portare a falsi - risultati positivi. Anche trattato con il reagente bloccante la perossidasi, il rossastro - il pigmento marrone delle bemoproteine potrebbe ancora esistere. I vetrini di controllo sono necessari per la corretta interpretazione di ogni serie di risultati della colorazione dei campioni: controllo positivo del tessuto, controllo negativo del tessuto e controllo negativo del reagente (diapositivo trattato con controllo isotipico al posto dell'anticorpo primario).
Avvertenze e precauzioni
1. Indossare adeguati dispositivi di protezione individuale per evitare il contatto con gli occhi e la pelle.
2. I campioni, prima o dopo la fissazione, e tutti i materiali ad essi esposti, devono essere maneggiati come se fossero infetti e smaltiti con le dovute precauzioni.
3. Non sostituire i reagenti con altri numeri di lotto o con kit di altri produttori.
4. Tempi o temperature di incubazione diversi da quelli consigliati devono essere convalidati dall'utente.
5. La soluzione non utilizzata deve essere smaltita secondo le normative locali.
2. I campioni, prima o dopo la fissazione, e tutti i materiali ad essi esposti, devono essere maneggiati come se fossero infetti e smaltiti con le dovute precauzioni.
3. Non sostituire i reagenti con altri numeri di lotto o con kit di altri produttori.
4. Tempi o temperature di incubazione diversi da quelli consigliati devono essere convalidati dall'utente.
5. La soluzione non utilizzata deve essere smaltita secondo le normative locali.
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