Anticorpo policlonale di coniglio topoisomerasi 1
Scheda tecnica
Caratteristiche principali e dettagli
Anticorpo policlonale di coniglio contro la topoisomerasi 1
- Obiettivo:
- Fonte/Ospite:
- Reattività:
- Clonalità:
- Applicazioni:
- Coniugazione:
- Stoccaggio:
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Marca:
N. CAT. : APA11433
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Dettagli del prodotto
Sfondo
Rilascia la tensione di superavvolgimento e torsione del DNA introdotta durante la replicazione e la trascrizione del DNA tagliando e ricongiungendo transitoriamente un filamento del duplex di DNA. Introduce una rottura del singolo filamento tramite transesterificazione in un sito bersaglio nel DNA duplex. Il fosfodiestere scissile viene attaccato dalla tirosina catalitica dell'enzima, provocando la formazione di un intermedio enzimatico del DNA-(3'-fosfotirosile)-e l'espulsione di un filamento di DNA 5'-OH. Il filamento di DNA libero ruota quindi attorno al legame fosfodiestere intatto sul filamento opposto, rimuovendo così i superavvolgimenti del DNA. Infine, nella fase di riligazione, il DNA 5'-OH attacca l'intermedio covalente per espellere il sito attivo -tirosina e ripristinare la struttura fosfodiesterica del DNA.
Applicazione
Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.
*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.
WB | 1:500 - 1:1000 |
Panoramica
Descrizione | Anticorpo policlonale di coniglio contro la topoisomerasi 1 |
Specificità | Riconosce i livelli endogeni della proteina Topoisomerasi 1. |
Tipo di anticorpi | Anticorpo primario |
Immunogeno | KLH-peptide sintetico coniugato che comprende una sequenza all'interno della regione centrale della topoisomerasi 1 umana. La sequenza esatta è proprietaria. |
Purificazione | L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena. |
Peso Molecolare | Previsto: 90 kD; Osservato: 115 kD |
Modulo/Buffer | Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio. |
Nomi alternativi | DNA topoisomerasi 1; DNA topoisomerasi I |
Simbolo del gene | TOP1 |
Entrez Gene | 7150(Umano); 21969(Topo); 64550(Ratto) |
SwissProt | P11387(Umano); Q04750(Topo); Q9WUL0(Ratto) |
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.
Dati
Analisi Western blot dell'espressione della topoisomerasi 1 nei lisati di cellule intere SHSY5Y (A), MCF7 (B), LO2 (C), HepG2 (D), CT26 (E). (Dimensione della banda prevista: 90 kD; Dimensione della banda osservata: 115 kD)
Stoccaggio
Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.
Nota
Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.
Domande frequenti
Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?
Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.
Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?
Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.
La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?
SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.
Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?
La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.
Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?
Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.
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