Anticorpo monoclonale di coniglio SMAD3 (C917)

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo monoclonale di coniglio ricombinante anti-SMAD3

Obiettivo: SMAD3
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : AMA00529

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

SMAD regolato dal recettore (R-SMAD) che è un trasduttore del segnale intracellulare e un modulatore trascrizionale attivato dal TGF-beta (fattore di crescita trasformante) e dalle chinasi del recettore dell'attivina di tipo 1. Lega l'elemento TRE nella regione promotrice di molti geni regolati dal TGF-beta e, alla formazione del complesso SMAD3/SMAD4, attiva la trascrizione. Può anche formare un complesso SMAD3/SMAD4/JUN/FOS nel sito AP-1/SMAD per regolare la trascrizione mediata da TGF-beta-. Ha un effetto inibitorio sulla guarigione delle ferite, probabilmente modulando sia la crescita che la migrazione dei cheratinociti primari e alterando la chemiotassi dei monociti mediata dal TGF-. Questo effetto sulla guarigione delle ferite sembra essere sensibile agli ormoni. Regolatore della condrogenesi e dell'osteogenesi e inibisce la guarigione precoce delle fratture ossee.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:200
SE/ICC	1:50 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo monoclonale di coniglio ricombinante anti-SMAD3
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina SMAD3
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario, ricombinante
Immunogeno	KLH-peptide sintetico coniugato che comprende una sequenza all'interno dell'SMAD3 umano. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 48 kD; Osservato: 50 kD
Modulo/Buffer	Liquido in PBS, pH 7,4, contenente 50% glicerolo, 0,2% BSA e 0,01% sodio azide.
Nomi alternativi	MADH3; Madri contro l'omologo decapentaplegico 3; Omologo MAD 3; Mad3; Madri contro l'omologo 3 del DPP; hMAD-3; JV15-2; Membro della famiglia SMAD 3; SMAD3; Smad3; hSMAD3
Simbolo del gene	SMAD3
Entrez Gene	4088(Umano); 17127(Topo); 25631(Ratto)
SwissProt	P84022(Umano); Q8BUN5(mouse); P84025(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i suoi prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale. Numero di clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione SMAD3 nei lisati di cellule intere A549 (A), THP1 (B), rene di topo (C), rene di ratto (D), muscolo di ratto (E). (Dimensione della banda prevista: 48 kD; Dimensione della banda osservata: 50 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione SMAD3 nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro al seno umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. Come cromogeno è stato utilizzato Tyramide-AREX® Fluor 488 (verde). La sezione è stata quindi controcolorata con DAPI (blu).

Analisi immunofluorescente della colorazione SMAD3 nelle cellule Hela. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera umidificata. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 594 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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