POFUT1 Anticorpo policlonale di coniglio

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio anti-POFUT1

Obiettivo: POFUT1
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, cane, scimmia, maiale
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC, IP
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA08024

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

Catalizza la reazione che lega il fucosio attraverso un legame O-glicosidico a un residuo conservato di serina o treonina trovato nella sequenza consenso C2-X(4,5)-[S/T]-C3 dei domini EGF, dove C2 e C3 sono la seconda e la terza cisteina conservata. Utilizza specificamente GDP-fucosio come substrato donatore ed è necessario un corretto accoppiamento disolfuro dei domini EGF del substrato per il trasferimento del fucosio. Svolge un ruolo cruciale nella segnalazione NOTCH. La fucosilazione iniziale di NOTCH da parte di POFUT1 genera un substrato per FRINGE/RFNG, un'acetilglucosaminiltransferasi che può quindi estendere la fucosilazione sulle ripetizioni di NOTCH EGF. Questa fucosilazione estesa è necessaria per il legame ottimale del ligando e la segnalazione canonica NOTCH indotta da DLL1 o JAGGED1.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:200
SE/ICC	1:100 - 1:500
IP	1:10 - 1:100

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio anti-POFUT1
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina POFUT1.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	KLH-peptide sintetico coniugato che comprende una sequenza all'interno della regione C-term del POFUT1 umano. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 22; Osservato: 44 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	FUT12; KIAA0180; GDP-fucosio proteina O-fucosiltransferasi 1; Peptide-O-fucosiltransferasi 1; O-FucT-1
Simbolo del gene	POFUT1
Entrez Gene	23509(Umano)
SwissProt	Q9H488(Umano)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di POFUT1 nei lisati di cellule intere K562 (A), HCT116 (B), HeLa (C). (Dimensione della banda prevista: 22; 43 kD; Dimensione della banda osservata: 44 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione POFUT1 nella sezione di tessuto incorporato in paraffina fissata in formalina del cervello umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione POFUT1 nelle cellule K562. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera umidificata. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato DyLight 594- (rosso) in PBS a temperatura ambiente al buio. DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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