Fosfo-Erk1 (T202 + Y204) + Erk2 (T185 + Y187) Anticorpo monoclonale di coniglio (ARA723)

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Phospho-Erk1 (T202 + Y204) + Erk2 (T185 + Y187) Rabbit Monoclonal Antibody(ARA723)

Caratteristiche principali e dettagli

Obiettivo: Fosfo-Erk1 (T202 + Y204) + Erk2 (T185 + Y187)
Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto
Clonalità: Monoclonale
Applicazione: WB, IHC, IF/ICC, FC
Stoccaggio: -20°C

Marca:

N. CAT. :ARA6509

US$ Scegli

Dimensioni:

100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

L'attivazione delle vie di trasduzione del segnale da parte di fattori di crescita, ormoni e neurotrasmettitori è mediata da due MAP chinasi strettamente correlate, p44 e p42, denominate chinasi extracellulare - correlata al segnale 1 (ERK 1) ed ERK 2, rispettivamente. Le proteine ERK sono regolate dalla doppia fosforilazione nella mappatura dei residui di tirosina 204 e 187 e treonina 177 e 160 all'interno di un caratteristico motivo Thr-Glu-Tyr. Per la completa attivazione enzimatica è necessaria la fosforilazione sui residui di treonina 202 e tirosina 204 di ERK1 e di treonina 185 e tirosina 187 di ERK2. Le conseguenze strutturali della doppia-fosforilazione nell'ERK2 includono la chiusura del sito attivo, l'allineamento dei residui catalitici chiave che interagiscono con l'ATP e il rimodellamento del ciclo di attivazione. In risposta all'attivazione, le MAP chinasi fosforilano i componenti a valle su serina e treonina. I regolatori della MAP chinasi a monte includono la MAP chinasi chinasi (MEK), la MEK chinasi e Raf-1. La famiglia ERK ha tre membri aggiuntivi: ERK 3, ERK 5 e ERK 6.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

Applicazione	Rapporto di diluizione
WB	1:5.000 - 1:10.000
SE/ICC	1:80 - 1:100
IHC	1:800 - 1:1.000
FC	1:800 - 1:1.000

*I risultati sono specifici del campione. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Tipo di anticorpi	Anticorpo monoclonale di coniglio ricombinante
Immunogeno	Peptide sintetico all'interno dell'ERK1 umano aa 166-215 / 379.
Peso Molecolare	Dimensione prevista della banda: 41/43 kDa
Controllo positivo	SH-SY5Y lisato cellulare, SH-SY5Y trattato con 100 ng/mL di hβ-NGF per 10 minuti lisato cellulare, PC-12 trattato con 100 ng/mL di hβ-NGF per 10 minuti lisato cellulare, SK-Br-3 lisato cellulare intero, NIH/3T3 lisato cellulare, NIH/3T3 trattato con 200nM PMA per Lisato cellulare di 30 minuti, HeLa trattato con PMA 200nM per lisato cellulare di 30 minuti, tessuto di carcinoma tiroideo umano.
Coniugazione	non coniugato
Modulo/Buffer	1×TBS (pH7,4), 0,05% BSA, 40% glicerolo. Conservante: 0,05% di sodio azide.
Isotipo	IgG
Purificazione	Affinità della proteina A purificata.

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot di Phospho-Erk1 (T202 + Y204) + Erk2 (T185 + Y187) su diversi lisati con Phospho-Erk1 (T202 + Y204) + Erk2 (T185 + Y187) anticorpo monoclonale di coniglio (ARA723).

Analisi immunoistochimica del tessuto di carcinoma tiroideo umano incluso in paraffina con l'anticorpo monoclonale di coniglio Phospho-Erk1 (T202 + Y204) + Erk2 (T185 + Y187) (ARA723).

Analisi immunocitochimica di cellule NIH/3T3 trattate con PMA 200nM per 30 minuti marcando Phospho-Erk1 (T202 + Y204) + Erk2 (T185 + Y187) con Phospho-Erk1 (T202 + Y204) + Erk2 (T185 + Y187) anticorpo monoclonale di coniglio (ARA723).

Analisi citometrica a flusso di cellule HeLa non trattate (a sinistra) o trattate (a destra) con PMA per 30 minuti marcanti Phospho-Erk1 (T202 + Y204) + Erk2 (T185 + Y187).

Stoccaggio

Spedito a 4 ℃. Conservare a -20℃ per un anno. Evitare cicli ripetuti di congelamento/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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