Anticorpo monoclonale murino PDHA1 (C2898)

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Topo monoclonale a PDHA1

Obiettivo: PDHA1
Fonte/Ospite: Topo
Reattività: Umano, topo, ratto
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC, IP, FC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : AMA02510

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Insieme al PDHB forma la subunità eterotetramerica E1 del complesso complesso della piruvato deidrogenasi (PDH). Il complesso PDH catalizza la conversione complessiva del piruvato in acetil-CoA e CO(2), e quindi collega la glicolisi citoplasmatica e il ciclo dell'acido tricarbossilico mitocondriale (TCA). Contiene copie multiple di tre componenti enzimatici: piruvato deidrogenasi (E1), diidrolipoamide acetiltransferasi (E2) e diidrolipoamide deidrogenasi (E3) (probabile). La subunità E1 catalizza sia la decarbossilazione dipendente dal tiamina pirofosfato (TPP) del piruvato, sia l'acetilazione riduttiva di un gruppo lipoilico legato covalentemente ai domini portanti lipoilici di E2.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:500
SE/ICC	1:50 - 1:100
FC	1:100 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Topo monoclonale a PDHA1
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina PDHA1
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	Proteina di fusione ricombinante del PDHA1 umano espressa in E. Coli
Purificazione	Questo anticorpo viene purificato attraverso una colonna di proteina G.
Peso Molecolare	Previsto: 43 kD; Osservato: 43 kD kD
Modulo/Buffer	IgG1 di topo. Liquido in PBS, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% sodio azide.
Nomi alternativi	PHE1A; Subunità alfa del componente E1 della piruvato deidrogenasi, forma somatica, mitocondriale; PDHE1-A tipo I
Simbolo del gene	PDHA1
Entrez Gene	5160(Umano); 18597(Topo)
SwissProt	P08559(Umano); P35486(Topo); P26284(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di PDHA1 nei lisati di cellule intere HepG2 (A), HEK293 (B), HL60 (C), SKOV3 (D), PC3 (E), PANC1 (F), NRK (G), C2C12 (H), C6 (I), PC12 (J). (Dimensione della banda prevista: 43 kD; Dimensione della banda osservata: 43 kD kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione PDHA1 nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro polmonare umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione PDHA1 nelle cellule Hela. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera nascosta. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 594 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Analisi citofluorimetrica delle cellule HeLa utilizzando l'anticorpo anti-PDHA1 (verde) e il controllo negativo (rosso).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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