Anticorpo monoclonale di coniglio PD-L1 (ARA730)

Caratteristiche principali e dettagli

  • Obiettivo: PD-L1
  • Fonte/Ospite: Coniglio
  • Reattività: Umano
  • Clonalità: Monoclonale
  • Applicazioni: WB,IHC,IF/ICC,FC,IP
  • Coniugazione: Non coniugato
  • Stoccaggio: a-20°C
  • Marca:
Dettagli del prodotto
Sfondo
Anticorpo monoclonale di coniglio ricombinante PD-L1 Scheda tecnica del prodotto Peso molecolare previsto: 33 kDa Purezza: IgG purificati per affinità ProA Reattività crociata della specie: Umana Forma: Liquido Reattività crociata della specie determinata da WB Swissprot ID: Q9NZQ7 Applicazioni: WB IHC IF/ICC FC IP Background: Coinvolto nel segnale costimolatorio, essenziale per T- proliferazione cellulare e produzione di IL10 e IFNG, in modo IL2-dipendente e PDCD1-indipendente. L'interazione con PDCD1 inibisce la proliferazione delle cellule T-e
Applicazione
Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB

1:2500-1:5000

IHC

1:100-1:200

SE/ICC

1:2000-1:10000

FC

1:50-1:200

IP

1:30

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.
Panoramica

Descrizione

Anticorpo monoclonale di coniglio contro PD-L1

Tipo di anticorpi

Anticorpo primario

MW previsto

33kDa

Immunogeno

Proteina ricombinante a lunghezza intera corrispondente al PD-L1 umano. L'immunogeno contiene il dominio extracellulare specifico di huPD-L1 (F19-T239).

Purificazione

IgG purificate per affinità ProA

Modulo/Buffer

PBS 59%, Sodio azide 0,01%, Glicerolo 40%, BSA 0,05%.

Nomi alternativi

B7H1; PDCD1L1; PDCD1LG1; PDL1; Morte cellulare programmata 1 ligando 1; PD-L1; ligando PDCD1 1; Legante di morte programmata 1; B7 omologo 1; B7-H1; CD274

Simbolo del gene

CD274

Entrez Gene

29126(Umano)

Swissprot

Q9NZQ7

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.
Dati

Tutte le corsie: anticorpo anti-PD-L1 alla diluizione 1:5.000
MW previsto: 33 kDa
MW osservato: 40-50 kDa

Corsia 1: HEK293 Sovraespressione di HuPD-L1
Corsia 2: HEK293

Lisati a 5 μg per corsia
2° Ab:
GAR HRP(H+L) 1:10.000
Esposizione: 100 secondi

Analisi immunoistochimica (formalina/PFA-paraffina fissa-sezioni incluse) del tessuto di adenocarcinoma polmonare umano marcante PD-L1 con ARA730 a 1:200. Il recupero dell'antigene mediato dal calore è stato eseguito utilizzando il tampone Tris/EDTA a pH 9,0.

Colorazione ARA730 di 293 cellule trasnfettate con il gene PD-L1 mediante IF/ICC (immunofluorescenza/immunocitochimica). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide, permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% e bloccate con siero di capra al 10% per mezz'ora a temperatura ambiente. I campioni sono stati incubati con l'anticorpo primario (1:10.000) a 4°C. Un anticorpo policlonale di capra anti-coniglio coniugato con Alexa Fluor® 488-è stato utilizzato come anticorpo secondario (1:500). DAPI (blu) è stato utilizzato come controcolorante nucleare.
Controllo: PBS e anticorpo secondario, un anticorpo di capra-IgG di coniglio coniugato con Alexa Fluor® 488-(1:500).

Istogramma sovrapposto che mostra 293 cellule trasfettate con il gene PD-L1 colorato con ARA730. Le cellule sono state quindi incubate nell'anticorpo (ARA730, diluizione 1:200) in 1x PBS/1% BSA per 30 minuti a temperatura ambiente. L'anticorpo secondario utilizzato era un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) alla diluizione 1:2.000 per 20 minuti a temperatura ambiente. Come controllo è stato utilizzato un campione senza etichetta (nero).

PD-L1 è stato immunoprecipitato da 0,2 mg di 293 lisati di cellule intere trasfettate con il gene PD-L1 con ARA730 alla diluizione 1:30.

2° Ab: GAR HRP per IP 1:500

Corsia 1: IP ARA730 in 293 lisati di cellule intere trasfettate con il gene PD-L1

Corsia 2: PBS invece di ARA730 in 293 lisati di cellule intere trasfettate con il gene PD-L1

Corsia 3: 293 lisati di cellule intere trasfettate con il gene PD-L1, 2 μg (input)

Esposizione: 10 secondi

Stoccaggio
Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.
Nota
Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.
Domande frequenti
Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?
Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.
Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?
Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.
La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?
SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.
Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?
La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.
Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?
Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.
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