Anticorpo policlonale di coniglio PAK4/5

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio anti-PAK4/5

Obiettivo: PAK4/5
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto, bovino
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA11069

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Serina/treonina-proteina chinasi che svolge un ruolo in una varietà di diverse vie di segnalazione tra cui la regolazione del citoscheletro, il turnover dell'adesione cellulare, la migrazione cellulare, la crescita, la proliferazione o la sopravvivenza cellulare. L'attivazione da parte di vari effettori, inclusi i recettori del fattore di crescita o CDC42 e RAC1 attivi, determina un cambiamento conformazionale e una successiva autofosforilazione su diversi residui di serina e/o treonina. Fosforila e inattiva la proteina fosfatasi SSH1, portando ad un aumento della fosforilazione inibitoria della cofilina, fattore legante/depolimerizzante dell'actina. La diminuzione dell'attività della cofilina può portare alla stabilizzazione dei filamenti di actina. Fosforila LIMK1, una chinasi che inibisce anche l'attività della cofilina. Fosforila l'integrina beta5/ITGB5 e quindi regola la motilità cellulare.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:100

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio anti-PAK4/5
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina PAK4/5.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	KLH-peptide sintetico coniugato che comprende una sequenza all'interno della regione C-term del PAK4/5 umano. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 64; Osservato: 72 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	KIAA1142; Serina/treonina-proteina chinasi PAK 4; p21-chinasi 4 attivata; PAK-4
Simbolo del gene	PAK4; PAK5
Entrez Gene	10298(Umano); 70584(Topo)
SwissProt	O96013; Q9P286(Umano); Q8BTW9(mouse)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di PAK4/5 nei lisati di cellule intere C6 (A), CT26 (B), A2780 (C), HCT116 (D), PC3 (E). (Dimensione della banda prevista: 64; 80 kD; Dimensione della banda osservata: 72 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione PAK4/5 nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro al seno umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunocitochimica della colorazione PAK4/5 nelle cellule HepG2. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera nascosta. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato con HRP-in PBS a temperatura ambiente. DAB è stato utilizzato come cromogeno.

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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