Anticorpo policlonale di coniglio NLRP3

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio anti-NLRP3

Obiettivo: NLRP3
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA14978

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

Componente sensore dell'inflammasoma NLRP3, che media l'attivazione dell'inflammasoma in risposta a difetti nell'integrità della membrana, portando alla secrezione di citochine infiammatorie IL1B e IL18 e piroptosi. In risposta agli agenti patogeni e ad altri segnali associati al danno che influenzano l'integrità delle membrane, avvia la formazione del complesso polimerico dell'inflammasoma composto da NLRP3, CASP1 e PYCARD/ASC. Il reclutamento di pro-caspase-1 (proCASP1) nell'inflammasoma NLRP3 promuove l'attivazione della caspasi-1 (CASP1), che successivamente scinde e attiva le citochine infiammatorie IL1B e IL18 e gasdermin-D (GSDMD), promuovendo la secrezione di citochine e la piroptosi . L'attivazione dell'inflammasoma NLRP3 è richiesta anche per la secrezione di HMGB1; stimolando le risposte infiammatorie.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:200
SE/ICC	1:50 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio anti-NLRP3
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina NLRP3.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	Proteina ricombinante della NLRP3 umana. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 83; Osservato: 118 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	C1orf7; CIAS1; NALP3; PYPAF1; Domini NACHT, LRR e PYD-contenenti la proteina 3; Recettore dell'angiotensina/vasopressina AII/AVP-simile; Proteina del bruco 1.1; CLR1.1; Sindrome autoinfiammatoria fredda 1 proteina; Criopirina; PIRIN-contenente APAF1-proteina 1 simile
Simbolo del gene	NLRP3
Entrez Gene	114548(Umano); 216799(Topo)
SwissProt	Q96P20(Umano); Q8R4B8(mouse)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di NLRP3 nei lisati di cellule intere di HT29 (A), cervello di topo (B), cervello di ratto (C). (Dimensione della banda prevista: 83; 105; 111; 112; 115; 118 kD; Dimensione della banda osservata: 118 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione NLRP3 nella sezione di tessuto incorporato in paraffina fissata in formalina di milza di topo. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione NLRP3 nelle cellule Raw264.7. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera umidificata. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato DyLight 594- (rosso) in PBS a temperatura ambiente al buio.

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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