Anticorpo policlonale di coniglio NF-kappaB p65 (Phospho-S536).

Scheda di sicurezza

NF-kappaB p65 (Phospho-S536) Rabbit Polyclonal Antibody

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio contro NF-kappaB p65 (Phospho-S536)

Obiettivo: NF-kappaB p65 (Fosfo-S536)
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto, scimmia, maiale
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC, IP
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA07495

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

NF-kappa-B è un fattore di trascrizione pleiotropico presente in quasi tutti i tipi cellulari ed è il punto finale di una serie di eventi di trasduzione del segnale che vengono avviati da una vasta gamma di stimoli legati a molti processi biologici come infiammazione, immunità, differenziazione, crescita cellulare, tumorigenesi e apoptosi. NF-kappa-B è un omo- o complesso eterodimerico formato dal dominio Rel-like-contenente le proteine RELA/p65, RELB, NFKB1/p105, NFKB1/p50, REL e NFKB2/p52. Il complesso eterodimerico RELA-NFKB1 sembra essere quello più abbondante. I dimeri si legano ai siti kappa-B nel DNA dei loro geni bersaglio e i singoli dimeri hanno preferenze distinte per diversi siti kappa-B che possono legarsi con affinità e specificità distinguibili.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:200
SE/ICC	1:50 - 1:200
IP	1:10 - 1:100

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio contro NF-kappaB p65 (Phospho-S536)
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina NF-kappaB p65 solo quando fosforilata a S536.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	KLH-fosfopeptide sintetico coniugato corrispondente ai residui che circondano S536 della proteina umana NF-kappaB p65. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 60 kD; Osservato: 75 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	NFKB3; Fattore di trascrizione p65; Fattore nucleare NF-kappa-B subunità p65; Fattore nucleare del potenziatore del gene del polipeptide leggero kappa nelle cellule B-3
Simbolo del gene	REL
Entrez Gene	5970(Umano); 19697(Topo)
SwissProt	Q04206(Umano); Q04207(Topo)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di NF-kappaB p65 (Phospho-S536) nei lisati di cellule intere Hela (A), HEK293T (B), NIH3T3 (C), rene di topo (D), H9C2 (E). (Dimensione della banda prevista: 60 kD; Dimensione della banda osservata: 75 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione NF-kappaB p65 (Phospho-S536) nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro al seno umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione NF-kappaB p65 (Phospho-S536) nel polmone di ratto. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 594-(rosso) in PBS a temperatura ambiente al buio. DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Curva dose-risposta dell'anticorpo ELISA diretto utilizzando l'anticorpo Anti-NF-kappaB p65 (Phospho-S536). La concentrazione dell'antigene (fosfopeptide e non-fosfopeptide) è 5 ug/ml. Anti-IgG di capra-coniglio (H&L) - L'HRP è stato utilizzato come anticorpo secondario e il segnale è stato sviluppato dal substrato TMB.

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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