Anticorpo policlonale di coniglio mTOR

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio anti-mTOR

Obiettivo: mTOR
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto, pecora
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA06996

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Serina/treonina chinasi proteica che è un regolatore centrale del metabolismo cellulare, della crescita e della sopravvivenza in risposta a ormoni, fattori di crescita, nutrienti, energia e segnali di stress. MTOR regola direttamente o indirettamente la fosforilazione di almeno 800 proteine. Funziona come parte di 2 complessi di segnalazione strutturalmente e funzionalmente distinti mTORC1 e mTORC2 (complesso mTOR 1 e 2). In risposta a nutrienti, fattori di crescita o amminoacidi, mTORC1 viene reclutato sulla membrana del lisosoma e promuove la sintesi di proteine, lipidi e nucleotidi fosforilando i regolatori chiave della traduzione dell'mRNA e della sintesi dei ribosomi. Ciò include la fosforilazione di EIF4EBP1 e il rilascio della sua inibizione verso il fattore di inizio allungamento 4E (eiF4E).

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:100
SE/ICC	1:50 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio anti-mTOR
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina mTOR.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	KLH-peptide sintetico coniugato che comprende una sequenza all'interno della regione C-term dell'mTOR umano. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 288 kD; Osservato: 289 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	FRAP; FRAP1; FRAP2; RAFT1; RAPT1; Serina/treonina-proteina chinasi mTOR; FK506-proteina legante 12-complesso della rapamicina-proteina associata 1; FKBP12-complesso della rapamicina-proteina associata; Bersaglio dei mammiferi della rapamicina; mTOR; Bersaglio meccanicistico della rapamicina; Rapamicina e FKBP12 mirano a 1; Proteina bersaglio 1 della rapamicina
Simbolo del gene	MTOR
Entrez Gene	2475(Umano); 56717(Topo); 56718(Ratto)
SwissProt	P42345(Umano); Q9JLN9(mouse); P42346(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di mTOR nei lisati di cellule intere HepG2 (A), MCF7 (B), H9C2 (C), AML12 (D). (Dimensione della banda prevista: 288 kD; Dimensione della banda osservata: 289 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione mTOR nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro al seno umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione mTOR nelle cellule MCF7. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera umidificata. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato DyLight 594- (rosso) in PBS a temperatura ambiente al buio.

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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