Anticorpo monoclonale di coniglio MSH6 (ARA741)

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Obiettivo: MSH6
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, Ratto
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB,IHC,IF/ICC,FC,IP
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. :ARA6528

US$ Scegli

Dimensioni:

100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

Componente del sistema di riparazione post-replicativo del disadattamento del DNA (MMR). Eterodimerizza con MSH2 per formare MutS alfa, che si lega ai disallineamenti del DNA avviando così la riparazione del DNA. Una volta legato, MutS alfa piega l'elica del DNA e protegge circa 20 paia di basi e riconosce i disallineamenti di singole basi e i cicli di inserimento/eliminazione di dinucleotidi (IDL) nel DNA. Dopo il legame non corrispondente, forma un complesso ternario con l'eterodimero MutL alfa, che si ritiene sia responsabile della direzione degli eventi MMR a valle, tra cui la discriminazione del filamento, l'escissione e la risintesi. Il legame e l'idrolisi dell'ATP svolgono un ruolo fondamentale nelle funzioni di riparazione del disadattamento.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:2000-1:5000
IHC	1:800-1:1600
SE/ICC	1:400-1:1000
FC	1:10-1:100
IP	1:25

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo monoclonale di coniglio contro MSH6
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
MW previsto	153kDa
Immunogeno	Peptide sintetico corrispondente ai residui di MSH6 entro aa1-100 di MSH6
Purificazione	IgG purificate per affinità ProA
Modulo/Buffer	PBS 59%, Sodio azide 0,01%, Glicerolo 40%, BSA 0,16%.
Nomi alternativi	GBP; Proteina di riparazione del disadattamento del DNA Msh6; hMSH6; Disadattamento G/T-proteina legante; GBP; GTMBP; MutS-subunità alfa 160 kDa; p160
Simbolo del gene	MSH6
Entrez Gene	2956(Umano)
Swissprot	P52701

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Tutte le corsie: anticorpo anti-MSH6 alla diluizione 1:5.000
MW previsto: 153 kDa
MW osservato: 163 kDa

Corsia 1: Hela
Corsia 2: A431
Corsia 3: SW480
Corsia 4: testicoli di ratto
Corsia 5: 293 HEK

Lisare a 20 µg per corsia
2° Ab:
G&R HRP(H+L) 1:10.000
Esposizione: 120s

Analisi immunoistochimica (formalina/PFA-paraffina fissa-sezioni incluse) del tessuto del colon umano marcante MSH6 con ARA741 a 1:500. Il recupero dell'antigene mediato dal calore è stato eseguito utilizzando il tampone Tris/EDTA a pH 9,0.

Colorazione ARA741 con MSH6 nelle cellule Hela mediante IF/ICC (immunofluorescenza/immunocitochimica). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide, permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% e bloccate con siero di capra al 10% per mezz'ora a temperatura ambiente. I campioni sono stati incubati con l'anticorpo primario (1:1.000) a 4°C. Come anticorpo secondario (1:500) è stato utilizzato un policlonale IgG di capra anti-coniglio coniugato con Alexa Fluor® 594-. DAPI (blu) è stato utilizzato come controcolorante nucleare.
Controllo: PBS e anticorpo secondario, An Alexa Fluor® 594-coniugato Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Istogramma sovrapposto che mostra le cellule Hela colorate con ARA741 (blu). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 4% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con TritonX-100 allo 0,1% per 15 minuti. Le cellule sono state quindi incubate nell'anticorpo (ARA741, diluizione 1:100) in 1x PBS/1% BSA per 30 minuti a temperatura ambiente. L'anticorpo secondario utilizzato era un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) alla diluizione 1:2.000 per 20 minuti a temperatura ambiente. Come controllo è stato utilizzato un campione senza etichetta (rosso).

MSH6 è stato immunoprecipitato da 0,4 mg di lisato di cellule intere Hela con ARA741 alla diluizione 1:25.
2° Ab:
GAR HRP per IP 1:500

Corsia 1: IP ARA741 nel lisato di cellule intere Hela
Corsia 2: PBS invece di ARA741 nel lisato di cellule intere Hela
Corsia 3: lisato di cellule intere Hela, 10 µg (input)

Esposizione: anni '50

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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