Kit ELISA Granzyme B per topi
Libretto del protocollo
Caratteristiche principali e dettagli
- Specifica:
- Sensibilità:
- Intervallo di curve standard:
- Gradiente curva standard:
- Numero di incubazioni:
- Volume del campione:
- Tipo di analisi:
- Durata dell'operazione:
-
Marca:
N. CAT. :AEM0016
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Dimensioni:
Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci
Dettagli del prodotto
Sfondo
Granzyme B è un membro della famiglia dei granzimi delle serina proteasi presenti specificamente nei granuli di linfociti T citotossici (CTL) e cellule natural killer (NK). Il Granzyme B svolge un ruolo essenziale nell'apoptosi mediata dai granuli utilizzando i substrati in questo approccio, come Caspase 3, Caspase 8 e Bid. Ricerche recenti indicano che la funzionalità del Granzyme B è stata ampliata per includere ruoli extracellulari insieme alla sua classica funzione pro-apoptotica. È stato scoperto che il Granzyme B è un importante mediatore delle lesioni cutanee, della riparazione e dell'infiammazione attraverso substrati extracellulari tra cui la laminina, VE-Cadherin, fibronectina e i proteoglicani Aggrecan e Decorin. - Essendo uno dei cinque Granzimi (A, B, H, K e M) identificati nel genoma umano, il Granzima B (32 kDa) è quello più ampiamente studiato in termini di funzione biologica e utilità nella salute e nella malattia. È sintetizzato come precursore (247 residui) con un peptide segnale (residui 1-18), un pro-peptide (residui 19-20) e una catena matura (residui 21-247). Una volta all'interno dei granuli, il Granzyme B viene completamente trasformato nella catena matura e diventa una proteasi disattivata quando il pro-peptide, Gly-Glu, viene rimosso dall'N-terminale mediante scissione con catepsina C. L'attività proteasica del Granzyme B è strettamente controllata dal Serpin B9/inibitore della proteasi 9. La sequenza aminoacidica del Granzyme B umano è identica per il 71%, 69% e 68% a quella canina, di ratto. e controparti murine, rispettivamente. - È stato dimostrato che i Granzimi modulano l’infiammazione e i livelli plasmatici di Granzima B sono stati riscontrati più elevati nella dermatite atopica e nella psoriasi rispetto ai controlli sani. Ciò è in contrasto con i livelli plasmatici di Granzyme A che rimangono invariati. Il siero dei pazienti affetti dal morbo di Crohn presenta livelli di Granzyme B significativamente più alti rispetto ai controlli.
Dati tipici
| pg/ml | D.O. | Nella media | Corretto | |
| 0.00 | 0.0150 | 0.0130 | 0.0140 | |
| 27.43 | 0.0230 | 0.0200 | 0.0215 | 0.0075 |
| 82.30 | 0.0340 | 0.0290 | 0.0315 | 0.0175 |
| 246.91 | 0.0680 | 0.0670 | 0.0675 | 0.0535 |
| 740.74 | 0.1650 | 0.1630 | 0.1640 | 0.1500 |
| 2222.22 | 0.4570 | 0.4220 | 0.4395 | 0.4255 |
| 6666.67 | 1.2100 | 1.1460 | 1.1780 | 1.1640 |
| 20000.00 | 2.7790 | 2.7510 | 2.7650 | 2.7510 |
Precisione
| Precisione intra-test | Precisione inter-test | |||||
| Numero del campione | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| Media (pg/ml) | 341.6 | 1646.5 | 5204.5 | 367.9 | 1876.2 | 5851.4 |
| Deviazione standard | 22.6 | 94.6 | 295.4 | 8.6 | 63.2 | 192.3 |
| Coefficiente di variazione(%) | 6.6 | 5.7 | 5.7 | 2.3 | 3.4 | 3.3 |
Precisione intra-test (Precisione all'interno di un test) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati venti volte su una piastra per valutare la precisione intra-test.
Precisione intra-analisi (precisione tra analisi) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati sei volte su una piastra per valutare la precisione intra-analisi.
Recupero dei picchi
Il recupero del picco è stato valutato aggiungendo 3 livelli di Mouse Granzyme B a un campione di siero di topo sano. Il siero non addizionato è stato utilizzato come bianco in questo esperimento.
Il recupero variava dal 107% al 132% con un recupero medio complessivo del 116%.
Il recupero variava dal 107% al 132% con un recupero medio complessivo del 116%.
Valori campione
| Matrice del campione | Campione valutato | Intervallo (pg/ml) | Rilevabile (%) | Media rilevabile (pg/ml) |
| Siero | 30 | 10.64-35.31 | 92 | 24.13 |
Siero/Plasma – In questo test è stata valutata la presenza di Granzyme B in trenta campioni provenienti da topi apparentemente sani. Non erano disponibili le cartelle cliniche dei donatori. nd = non-rilevabile. I campioni misurati al di sotto della sensibilità sono considerati non-rilevabili.
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