Anticorpo monoclonale di coniglio MLH1 (ARA749)

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Obiettivo: MLH1
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: IHC,FC,SE/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. :ARA6536

US$ Scegli

Dimensioni:

100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Eterodimerizza con PMS2 per formare MutL alfa, un componente del sistema di riparazione del disadattamento post-replicativo del DNA (MMR). La riparazione del DNA viene avviata dal legame di MutS alfa (MSH2-MSH6) o MutS beta (MSH2-MSH3) a un disadattamento del dsDNA, quindi MutL alfa viene reclutato nell'eteroduplex. L'assemblaggio del complesso ternario MutL-MutS-eteroduplex in presenza di RFC e PCNA è sufficiente per attivare l'attività endonucleasica di PMS2. Introduce rotture del singolo filamento vicino al disadattamento e quindi genera nuovi punti di ingresso per l'esonucleasi EXO1 per degradare il filamento contenente il disadattamento. La metilazione del DNA impedirebbe la scissione e quindi garantirebbe che solo il filamento di DNA appena mutato verrà corretto.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

IHC	1:200-1:400
SE/ICC	1:200-1:1000
FC	1:20-1:100

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo monoclonale di coniglio contro MLH1
Tipo di anticorpo	Anticorpo primario
MW previsto	84kDa
Immunogeno	Come immunogeno è stato utilizzato un peptide sintetico corrispondente ai residui MLH1 all'interno di aa400-500 di MLH1.
Purificazione	IgG purificate per affinità ProA
Modulo/Buffer	PBS 59%, Sodio azide 0,01%, Glicerolo 40%, BSA 0,24%.
Nomi alternativi	COCA2; Proteina di riparazione del disadattamento del DNA Mlh1; Omologo della proteina MutL 1
Simbolo del gene	MLH1
Entrez Gene	4292(Umano)
Swissprot	P40692

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi immunoistochimica (formalina/PFA-paraffina fissa-sezioni incluse) del tessuto del colon umano marcante MLH1 con ARA749 a 1:200. Il recupero dell'antigene mediato dal calore è stato eseguito utilizzando il tampone Tris/EDTA a pH 9,0.

Istogramma sovrapposto che mostra le cellule Hela colorate con ARA749 (rosso). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 4% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con TritonX-100 allo 0,1% per 15 minuti. Le cellule sono state quindi incubate nell'anticorpo (ARA749, diluizione 1:100) in 1x PBS/1% BSA per 30 minuti a temperatura ambiente. L'anticorpo secondario utilizzato era un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor^® 488 (IgG H+L) alla diluizione 1:2.000 per 20 minuti a temperatura ambiente. Come controllo è stato utilizzato un campione senza etichetta (nero).

Colorazione ARA749 con MLH1 nelle cellule Hela mediante IF/ICC (immunofluorescenza/immunocitochimica). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide, permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% e bloccate con siero di capra al 10% per mezz'ora a temperatura ambiente. I campioni sono stati incubati con l'anticorpo primario (1:1.000) a 4°C. Come anticorpo secondario (1:500) è stato utilizzato un policlonale IgG di capra anti-coniglio coniugato con Alexa Fluor^® 488-. DAPI (blu) è stato utilizzato come controcolorante nucleare.
Controllo: PBS e anticorpo secondario, An Alexa Fluor^® 488-coniugato Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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