Anticorpo monoclonale di coniglio MGMT (ARA735)

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Obiettivo: MGMT
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB,IHC,FC,IP
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. :ARA6522

US$ Scegli

Dimensioni:

100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Coinvolto nella difesa cellulare contro gli effetti biologici della O6-metilguanina (O6-MeG) e della O4-metiltimina (O4-MeT) nel DNA. Ripara la base azotata metilata nel DNA trasferendo stechiometricamente il gruppo metilico a un residuo di cisteina nell'enzima. Si tratta di una reazione suicida: l'enzima viene inattivato irreversibilmente.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:5000-1:10000
IHC	1:100-1:200
FC	1:10-1:200
IP	1:80

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo monoclonale di coniglio contro MGMT
Tipo di anticorpo	Anticorpo primario
MW previsto	22kDa
Immunogeno	Come immunogeno è stato utilizzato un peptide sintetico corrispondente ai residui sul terminale N-terminale dell'MGMT umano.
Purificazione	IgG purificate per affinità ProA
Modulo/Buffer	PBS 59%, Sodio azide 0,01%, Glicerolo 40%, BSA 0,10%.
Nomi alternativi	Metilato-DNA--proteina-cisteina metiltransferasi; 6-O-metilguanina-DNA metiltransferasi; MGMT; O-6-metilguanina-DNA-alchiltransferasi
Simbolo del gene	MGMT
Entrez Gene	4255(Umano)
Swissprot	P16455

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Tutte le corsie: anticorpo anti-MGMT
alla diluizione 1:5.000
MW previsto: 22 kDa
MW osservato: 22 kDa

Corsia 1: MCF-7
Corsia 2: Jurkat
Corsia 3: Hela
Corsia 4: HT-29

Lisati a 20 µg per corsia
2° Ab:
GAR HRP(H+L) 1:10.000
Esposizione: 120s

Analisi immunoistochimica (formalina/PFA-paraffina fissa-sezioni incluse) del tessuto mammario umano marcante MGMT con ARA735 a 1:200. Il recupero dell'antigene mediato dal calore è stato eseguito utilizzando il tampone Tris/EDTA a pH 9,0.

Istogramma sovrapposto che mostra le cellule Jurkat colorate con ARA735 (blu). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 4% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con TritonX-100 allo 0,1% per 15 minuti. Le cellule sono state quindi incubate nell'anticorpo (ARA735, diluizione 1:50) in 1x PBS/1% BSA per 30 minuti a 4°C. L'anticorpo secondario utilizzato era un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor<sup>®</sup> 488 (IgG H+L) alla diluizione 1:2.000 per 20 minuti a 4°C.
Come controllo è stato utilizzato un campione senza etichetta (rosso).

MGMT è stato immunoprecipitato da 0,4 mg di lisato di cellule intere Hela con ARA735 alla diluizione 1:80.
2° Ab:
GAR HRP per IP 1:500

Corsia 1: ARA735 IP nel lisato di cellule intere Hela
Corsia 2: PBS invece di ARA735 nel lisato di cellule intere Hela
Corsia 3: lisato di cellule intere Hela, 10 µg (input)

Esposizione: 120s

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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