Anticorpo monoclonale di coniglio L-lattile-istone H3 (Lys18) (ARA873)-grado ChIP

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) Rabbit Monoclonal Antibody(ARA873)-ChIP Grade

Caratteristiche principali e dettagli

Obiettivo: L-Lattile-Istone H3 (Lys18)
Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo
Clonalità: Monoclonale
Applicazione: WB, ChIP, Taglia&tag
Stoccaggio: -20°C

Marca:

N. CAT. :ARA6699

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Gli istoni sono proteine nucleari di base responsabili della struttura nucleosomica della fibra cromosomica negli eucarioti. Questa struttura è costituita da circa 146 bp di DNA avvolti attorno a un nucleosoma, un ottamero composto da coppie di ciascuno dei quattro istoni centrali (H2A, H2B, H3 e H4). La fibra cromatinica viene ulteriormente compattata attraverso l'interazione di un istone linker, H1, con il DNA tra i nucleosomi per formare strutture cromatiniche di ordine superiore. Questo gene è privo di introni e codifica per un istone replicazione-dipendente che è un membro della famiglia degli istoni H3. Le trascrizioni di questo gene mancano di code poliA; contengono invece un elemento di terminazione palindromo. Questo gene si trova nel grande cluster di geni istonici sul cromosoma 6p22-p21.3.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

Applicazione	Rapporto di diluizione
WB	1:500 - 1:1000
Chip	6 μg/5×10⁶ cellule
Taglia&tag	1:100

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Isotipo	IgG
Purificazione	Proteina A
Localizzazione cellulare	Nucleo
Modulo/Buffer	PBS, glicerolo, BSA
ID UniProt	P68431
Sinonimi	H3K18la
Coniugato	Non coniugato
Specificità	Anti-L-Lattil-Istone H3 (Lys18) mAb di coniglio (grado ChIP) rileva l'istone H3 solo quando è L-lattilato a Lys18.
ID UniProt	P68431
Immunogeno	Peptide dell'istone umano H3 (Lys18) L-lattilato
MW (kDa)	15

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Quantità di peptide: 4 ng, 16 ng, 64 ng
Tampone bloccante: 5% NFDM/TBST
Diluizione dell'Ab primario: 1:2000
Incubazione dell'Ab primario: 2 ore a temperatura ambiente
Ab secondario: Anti-capra-IgG di coniglio H&L pAb (coniugato HRP)
Tempo di esposizione: 10 secondi
L'elenco dei peptidi utilizzati nell'esperimento è fornito di seguito.
Corsia 1: H3K18 L-lattile. Corsia 2: acetile H3K18.
Corsia 3: crotonile H3K18. Corsia 4: butirrile H3K18.
Corsia 5: propionile H3K18. Corsia 6: H3K18 2-idrossiisobutirrile.
Corsia 7: H3K18 β-idrossibutirrile. Corsia 8: H3K18 non modificato

Lisati: (-) cellule HeLa; (+) cellule HeLa trattate con lattato di sodio 25 mM per 24 ore
Quantità di carico proteico: 20 μg
Tampone bloccante: 5% NFDM/TBST
Diluizione dell'Ab primario: 1:1000
Incubazione dell'Ab primario: 2 ore a temperatura ambiente
Ab secondario: H&L pAb di capra Anti-Coniglio IgG (HRP coniugato)
Tempo di esposizione: 60 secondi
Dimensione della banda prevista: 15 kDa
Dimensione della banda osservata: 15 kDa

Lisati: (-) cellule K562; (+) cellule K562 trattate con lattato di sodio 25 mM per 24 ore
Quantità di carico proteico: 20 μg
Tampone bloccante: 5% NFDM/TBST
Diluizione dell'Ab primario: 1:1000
Incubazione dell'Ab primario: 2 ore a temperatura ambiente
Ab secondario: H&L pAb anti IgG di coniglio - coniugato)
Tempo di esposizione: 60 secondi
Dimensione della banda prevista: 15 kDa
Dimensione della banda osservata: 15 kDa

Lisati: (-) cellule NIH/3T3; (+) cellule NIH/3T3 trattate con lattato di sodio 25 mM per 24 ore
Quantità di carico proteico: 20 μg
Tampone bloccante: 5% NFDM/TBST
Diluizione dell'Ab primario: 1:1000
Incubazione dell'Ab primario: 2 ore a temperatura ambiente
Ab secondario: Anticorpo di capra-IgG di coniglio H&L pAb (Coniugato HRP)
Tempo di esposizione: 60 secondi
Dimensione della banda prevista: 15 kDa
Dimensione della banda osservata: 15 kDa

Campione: cellule HeLa trattate con lattato di sodio 100 mM per 24 ore
Condizioni di reticolazione: nessuna reticolazione
Quantità di cromatina per IP: 5×10⁶ cellule
Quantità di Ab per IP: 6 μg
Tipo di sfere e quantità per IP: 50 μL di proteina A MagBeads
Descrizione: cromatina le immunoprecipitazioni sono state eseguite con 6 μg di IgG di coniglio normali come controllo negativo. Il DNA immunoprecipitato è stato quantificato mediante PCR real-time utilizzando primer specifici per le regioni umane GAPDH-CDS, promotore LDHA, LDHA, FOXO3a downstream, RAB20 e TUBBP10. I dati vengono presentati come arricchimento di ciascun campione rispetto alla quantità totale di input in ciascun amplicone.

Campione: cellule HeLa trattate con lattato di sodio 100 mM per 24 ore
Quantità di cellule: 1×10⁵ cellule
Diluizione dell'Ab primario: 1:100
Incubazione dell'Ab primario: 4⁰C durante la notte
Ab secondario: Anticorpo di capra-IgG di coniglio H&L pAb
Ab secondario diluizione: 1:1400
Descrizione: CUT&Tag è stato eseguito con anti-L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) mAb di coniglio insieme a normali IgG di coniglio come controllo negativo. Il DNA risultante è stato sequenziato sulla piattaforma Illumina NovaSeq con letture accoppiate-end di 150 bp e una profondità di sequenziamento di 3 milioni di letture. La figura mostra significativi arricchimenti del segnale H3K18la nelle regioni del promotore di CD9, PLEKHG6, LTBR e GAPDH.

Stoccaggio

Spedito a 4 ℃. Conservare a -20℃ per un anno. Evitare cicli ripetuti di congelamento/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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