Kit ELISA per TPO/trombopoietina umana
N. CAT. : AEH0197
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Sfondo
La trombopoietina (Tpo) è un regolatore chiave della megacariocitopoiesi e della trombopoiesi. Viene prodotto principalmente nel fegato ed è legato e internalizzato dal recettore Tpo R/c-mpl. Difetti nella via di segnalazione Tpo-Tpo R sono associati a una varietà di disturbi piastrinici. Il precursore della Tpo murina da 356 aminoacidi (aa) viene scisso per produrre la proteina matura da 335 aa. La Tpo di topo maturo condivide rispettivamente il 71% e l'81% di omologia di sequenza aa con la Tpo umana e di ratto. È una proteina da 80‑85 kDa costituita da un dominio N-terminale con omologia con l'eritropoietina (Epo) e un dominio C‑terminale che contiene più siti di glicosilazione N-linked e O-linked. Lo splicing alternativo tessuto-specifico della Tpo di topo genera isoforme multiple con delezioni interne, inserzioni e/o sostituzioni C-terminali. Tpo promuove la differenziazione, la proliferazione e la maturazione di MK e dei loro progenitori. Anche molte altre citochine possono promuovere queste funzioni, ma solo in collaborazione con Tpo. In particolare, IL-3 induce in modo indipendente lo sviluppo di MK, sebbene i suoi effetti siano limitati alle prime fasi del lignaggio MK. La Tpo promuove inoltre la produzione, l’aggregazione, l’adesione all’ECM e l’attivazione piastrinica. Viene scisso dalla trombina derivata dalle piastrine seguendo l'Arg191 all'interno del dominio C-terminale e successivamente in altri siti dopo una digestione prolungata. Nel plasma circolano la Tpo a tutta lunghezza e le forme più corte. Il dominio C-terminale non è richiesto per legarsi a Tpo R o per indurre la crescita e la differenziazione di MK. A parte i suoi effetti ematopoietici, la Tpo è espressa nel cervello dove promuove l'apoptosi dei neuroni sensibilizzati all'ipossia e inibisce la differenziazione neuronale bloccando la segnalazione indotta da NGF.
Dati tipici
|
pg/ml |
D.O. |
Nella media |
Corretto |
|
|
0.00 |
0.0260 |
0.0252 |
0.0256 |
|
|
8.19 |
0.0460 |
0.0467 |
0.0464 |
0.0208 |
|
20.48 |
0.0769 |
0.0723 |
0.0746 |
0.0490 |
|
51.20 |
0.1445 |
0.1427 |
0.1436 |
0.1180 |
|
128.00 |
0.3214 |
0.3069 |
0.3142 |
0.2886 |
|
320.00 |
0.6924 |
0.6953 |
0.6939 |
0.6683 |
|
800.00 |
1.6190 |
1.5460 |
1.5825 |
1.5569 |
|
2000.00 |
3.2320 |
3.2120 |
3.2220 |
3.1964 |
Precisione
|
Precisione intra-test |
Precisione inter-test |
|||||
|
Numero del campione |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Media (pg/ml) |
40.7 |
197.2 |
578.0 |
37.2 |
208.0 |
617.8 |
|
Deviazione standard |
2.9 |
9.9 |
34.8 |
2.4 |
11.7 |
41.3 |
|
Coefficiente di variazione(%) |
7.1 |
5.0 |
6.0 |
6.5 |
5.6 |
6.7 |
Precisione intra-analisi (precisione tra analisi) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati sei volte su una piastra per valutare la precisione intra-analisi.
Recupero dei picchi
Il recupero del picco è stato valutato aggiungendo 3 livelli di TPO/trombopoietina umana a un campione di siero umano sano. Il siero non addizionato è stato utilizzato come bianco in questo esperimento.
Il recupero variava dall'88% al 128% con un recupero medio complessivo del 114%.
Il recupero variava dall'88% al 128% con un recupero medio complessivo del 114%.
Valori campione
| Matrice del campione | Campione valutato | Intervallo (pg/ml) | Rilevabile (%) | Media rilevabile (pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| Siero | 30 | 5.60-1005.88 | 100 | 253.32 |
Siero/Plasma – Trenta campioni provenienti da volontari apparentemente sani sono stati valutati per la presenza di TPO/trombopoietina in questo test. Non erano disponibili le cartelle cliniche dei donatori.
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