Kit ELISA PD-L1/B7-H1 umano
Libretto del protocollo
Caratteristiche principali e dettagli
- Specifica:
- Sensibilità:
- Intervallo di curve standard:
- Gradiente curva standard:
- Numero di incubazioni:
- Volume del campione:
- Tipo di analisi:
- Durata dell'operazione:
-
Marca:
N. CAT. :AEH0048
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Dimensioni:
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Dettagli del prodotto
Sfondo
L'omologo 1 della B7 umana (B7-H1), chiamato anche ligando 1 della morte programmata (PD-L1) e ligando 1 della morte cellulare programmata 1 (PDCD1L1), è un membro della crescente famiglia B7 di proteine immunitarie che forniscono segnali sia per stimolare che per inibire l'attivazione delle cellule T. Altri membri della famiglia includono B7-1, B7-2, B7-H2, PDL2 e B7-H3. Le proteine B7 sono membri della superfamiglia delle immunoglobuline (Ig). I loro domini extracellulari contengono 2 domini Ig-like e tutti i membri hanno domini citoplasmatici corti. Tra i membri della famiglia, c'è circa il 20-25% di identità di aminoacidi. B7-H1 umano e di topo condividono circa il 70% dell'identità della sequenza aminoacidica. B7-H1 è stato identificato come uno dei due ligandi della morte programmata-1 (PD-1), un membro della famiglia di immunorecettori CD28. Il gene B7-H1 codifica per una proteina precursore della membrana di tipo I da 291 aminoacidi (aa) con un presunto peptide segnale di 18 aa, un dominio extracellulare di 220 aa, una regione transmembrana di 21 aa e un dominio citoplasmatico di 31 aa. La B7-H1 umana è espressa in modo costitutivo in diversi organi come cuore, muscolo scheletrico, placenta e polmone e in quantità minori nel timo, milza, rene e fegato. L'espressione di B7-H1 è sovraregolata in una piccola frazione di cellule T e B attivate e in una frazione molto più ampia di monociti attivati. L'espressione di B7-H1 è indotta anche nelle cellule dendritiche e nei cheratinociti dopo la stimolazione con IFN-gamma. L'interazione di B7-H1 con PD-1 determina l'inibizione della proliferazione mediata da TCR-e della produzione di citochine. La via B7-H1:PD-1 è coinvolta nella regolazione negativa di alcune risposte immunitarie e può svolgere un ruolo importante nella regolazione della tolleranza periferica.
Dati tipici
| pg/ml | D.O. | Nella media | Corretto | |
| 0.00 | 0.0240 | 0.0272 | 0.0256 | |
| 40.96 | 0.0357 | 0.0431 | 0.0394 | 0.0138 |
| 102.40 | 0.0584 | 0.0637 | 0.0611 | 0.0355 |
| 256.00 | 0.1099 | 0.1093 | 0.1096 | 0.0840 |
| 640.00 | 0.2389 | 0.2377 | 0.2383 | 0.2127 |
| 1600.00 | 0.6145 | 0.6434 | 0.6290 | 0.6034 |
| 4000.00 | 1.6350 | 1.7290 | 1.6820 | 1.6564 |
| 10000.00 | 3.6290 | 3.8300 | 3.7295 | 3.7039 |
Precisione
| Precisione intra-test | Precisione inter-test | |||||
| Numero del campione | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| Media (pg/ml) | 209.2 | 1061.1 | 2965.9 | 236.7 | 1178.3 | 3104.7 |
| Deviazione standard | 13.1 | 60.9 | 181 | 15.6 | 50 | 169.9 |
| Coefficiente di variazione(%) | 6.3 | 5.7 | 6.1 | 6.6 | 4.2 | 5.5 |
Precisione intra-test (Precisione all'interno di un test) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati venti volte su una piastra per valutare la precisione intra-test.
Precisione intra-analisi (precisione tra analisi) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati sei volte su una piastra per valutare la precisione intra-analisi.
Recupero dei picchi
Il recupero del picco è stato valutato aggiungendo 3 livelli di PD-L1 umano a un campione di siero umano sano. Il siero non addizionato è stato utilizzato come bianco in questo esperimento.
Il recupero variava dal 96% al 127% con un recupero medio complessivo del 117%.
Il recupero variava dal 96% al 127% con un recupero medio complessivo del 117%.
Valori campione
| Matrice del campione | Campione valutato | Intervallo (pg/ml) | Rilevabile (%) | Media rilevabile (pg/ml) |
| Siero | 30 | nd-124.46 | 63 | 36.72 |
Siero/Plasma – In questo test è stata valutata la presenza di PD-L1 in trenta campioni provenienti da volontari apparentemente sani. Non erano disponibili le cartelle cliniche dei donatori.
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