Kit ELISA IL-6 umano

L'interleuchina 6 (IL-6) è una citochina pleiotropica, a-elicoidale, fosforilata da 22-28 kDa e glicosilata in modo variabile che svolge un ruolo importante nella reazione di fase acuta, nell'infiammazione, nell'ematopoiesi, nel metabolismo osseo e nella progressione del cancro. L'IL-6 umana matura ha una lunghezza di 183 aminoacidi (aa) e condivide il 39% dell'identità di sequenza aa con l'IL-6 di topo e ratto. Lo splicing alternativo genera diverse isoforme con delezioni interne, alcune delle quali presentano proprietà antagoniste. Le cellule note per esprimere IL-6 includono cellule T CD8+, fibroblasti, sinoviociti, adipociti, osteoblasti, megacariociti, cellule endoteliali (sotto l'influenza di endoteline), neuroni simpatici, neuroni della corteccia cerebrale, cellule cromaffini della midollare surrenale, cellule pigmentate della retina, mastociti, cheratinociti, cellule di Langerhans, astrociti fetali e adulti, neutrofili, monociti, eosinofili, cellule epiteliali del colon, cellule B B1 e cellule beta delle isole pancreatiche. La produzione di IL-6 è generalmente correlata all’attivazione cellulare ed è normalmente tenuta sotto controllo da glucocorticoidi, catecolamine e steroidi sessuali secondari. L'IL-6 circolante umana normale è nell'intervallo di 1 pg/mL, con lievi aumenti durante il ciclo mestruale, modesti aumenti in alcuni tumori e grandi aumenti dopo l'intervento chirurgico. IL-6 induce la segnalazione attraverso un complesso recettoriale eterodimerico sulla superficie cellulare composto da una subunità legante il ligando (IL-6 R alfa) e una subunità trasduttrice del segnale (gp130). IL-6 si lega a IL-6 Ra, innescando l'associazione di IL-6 Ra con la dimerizzazione di gp130 e gp130. gp130 è anche un componente dei recettori per CLC, CNTF, CT-1, IL-11, IL-27, LIF e OSM. Le forme solubili di IL-6 Ra sono generate sia dallo splicing alternativo che dalla scissione proteolitica. In un meccanismo noto come trans-segnalazione, i complessi di IL-6 e IL-6 Ra solubili suscitano risposte da cellule che esprimono gp130-prive di IL-6 Ra sulla superficie cellulare. La trans-segnalazione consente a una gamma più ampia di tipi cellulari di rispondere a IL-6, poiché l'espressione di gp130 è ubiquitaria, mentre quella di IL-6 Ra è prevalentemente limitata a epatociti, monociti e linfociti a riposo. Le forme di splice solubili di gp130 bloccano la trans-segnalazione di IL-6/IL-6 Ra ma non di altre citochine che utilizzano gp130 come co-recettore. IL-6, insieme a TNF-a e IL-1, guida la risposta infiammatoria acuta. IL-6 è quasi esclusivamente responsabile della febbre e della risposta della fase acuta nel fegato, ed è importante nella transizione dall’infiammazione acuta all’immunità acquisita o alla malattia infiammatoria cronica. Quando disregolato, contribuisce all’infiammazione cronica in condizioni quali obesità, resistenza all’insulina, malattie infiammatorie intestinali, artrite e sepsi. IL-6 modula il riassorbimento osseo ed è uno dei principali effettori della distruzione articolare infiammatoria nell'artrite reumatoide attraverso la promozione dello sviluppo e dell'attività delle cellule Th17. Contribuisce allo sviluppo e alla destabilizzazione della placca aterosclerotica, nonché allo sviluppo della carcinogenesi associata all'infiammazione.

pg/ml	D.O.		Nella media	Corretto
0	0.021	0.024	0.0225
1.37	0.0293	0.0281	0.0287	0.0062
4.12	0.0454	0.0467	0.0461	0.0236
12.35	0.096	0.0964	0.0962	0.0737
37.04	0.271	0.2485	0.2598	0.2373
111.11	0.682	0.6878	0.6849	0.6624
333.33	1.8285	1.7097	1.7691	1.7466
1000	3.7268	3.8787	3.8028	3.7803

	Precisione intra-test			Precisione inter-test
Numero del campione	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Media (pg/ml)	24	115.4	263.2	24.5	132.1	353.3
Deviazione standard	1.3	4.5	9.3	2	5.9	18.4
Coefficiente di variazione(%)	5.6	3.9	3.6	6.2	4.4	5.2

Precisione intra-test (Precisione all'interno di un test) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati venti volte su una piastra per valutare la precisione intra-test.

Precisione intra-analisi (precisione tra analisi) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati sei volte su una piastra per valutare la precisione intra-analisi.

Il recupero del picco è stato valutato aggiungendo 3 livelli di IL-6 umana a un campione di siero umano sano. Il siero non addizionato è stato utilizzato come bianco in questo esperimento.

Il recupero variava dall'84% al 115% con un recupero medio complessivo del 99%.

Matrice del campione	Campione valutato	Intervallo (pg/ml)	Rilevabile (%)	Media rilevabile (pg/ml)
Siero	30	2.12-6.46	100	3.53

Siero/Plasma – In questo test è stata valutata la presenza di IL-10 in trenta campioni provenienti da volontari apparentemente sani. Non erano disponibili le cartelle cliniche dei donatori.

nd = non-rilevabile. I campioni misurati al di sotto della sensibilità sono considerati non-rilevabili.