Kit ELISA IL-1RA/IL-1F3 umano

L'antagonista del recettore dell'interleuchina-1 (IL-1ra; noto anche come IL-1F3) è un membro da 22-25 kDa della famiglia di citochine IL-1. Attualmente, ci sono 11 membri della famiglia (IL-1F1-F11), nove dei quali formano un cluster di geni IL-1 sulla Ch2 umana. Ogni membro della famiglia IL-1 contiene una piega IL-1. Questa piega è generata da 12 fogli beta impacchettati che interagiscono per formare una struttura beta -a trifoglio. Per ottenere questa struttura è necessaria poca omologia di aminoacidi (aa) e questo spiega la bassa identità di aa tra i membri della famiglia IL-1. IL-1ra è un antagonista puro del recettore delle citochine che non ha attività di inizio della trasduzione del segnale. È una proteina della fase acuta che esiste per smorzare l’infiammazione. IL-1(beta) viene inizialmente prodotto dai monociti in risposta a una varietà di stimoli. L’IL-1 circolante si lega quindi ai recettori dell’IL-1 di tipo I ampiamente espressi (IL-1 RI) e dà inizio a una serie di eventi pro-infiammatori. Sulle cellule endoteliali (EC), IL-1 induce il rilascio di PGE2 e IL-6, generando febbre, trombocitosi e produzione epatica di proteine ​​della fase acuta. Nelle articolazioni sinoviali, IL-1 induce la produzione di NO da parte dei condrociti, un evento che porta a una ridotta sintesi del collagene e all’apoptosi dei condrociti. Infine, IL-1 aumenta la conta dei neutrofili, sia nel sangue che nei tessuti, ed è quindi in grado di promuovere un ambiente pro-infiammatorio in molteplici sedi. IL-1ra blocca l’azione di IL-1 attraverso l’inibizione competitiva. Più correttamente, sebbene IL-1ra riempia il sito di legame di IL-1 in IL-1 RI, non è nemmeno in grado di orchestrare la creazione di un complesso eterodimerico della proteina accessoria IL-1 R AcP (IL-1 R AcP) che trasduce il segnale. Le concentrazioni efficaci di IL-1ra sono generalmente 100-volte maggiori delle concentrazioni locali di IL-1. Questo perché l’emivita dell’IL-1ra è di soli 6 minuti, e pochissimi recettori dell’IL-1 di tipo I necessitano di essere coinvolti dall’IL-1 per suscitare una risposta cellulare.

L'IL-1ra umana è sintetizzata come un precursore di 177 aa che contiene una sequenza segnale di 25 aa e una regione matura di 152 aa. Sebbene contenga un ripiegamento della citochina IL-1, apparentemente manca di due motivi strutturali che consentono l'attivazione dell'eterodimero del recettore IL-1. Innanzitutto, e dopo il legame con IL-1 RI, la presenza di Ile 51-His 54 e Lys 145 della molecola matura preclude il reclutamento di IL-1 R AcP. In secondo luogo, non esiste un segmento di lectina C-terminale identificabile che si ipotizza possa aiutare a reclutare una componente accessoria di segnalazione. L’IL-1ra umana matura è identica per il 77% e l’82% aa all’IL-1ra del topo e del cane, rispettivamente, e l’IL-1ra umana inibisce l’attività dell’IL-1 sulle cellule del topo. Numerosi tipi di cellule esprimono IL-1ra, inclusi monociti, cellule del Sertoli, epatociti, adipociti, fibroblasti sinoviali, mastociti, cellule beta pancreatiche e cellule epiteliali intestinali. Esistono almeno tre isoforme intracellulari di IL-1ra (icIL-1ra1, 2 e 3). Tutti mostrano variazione N-terminale e tutti contengono aminoacidi 35-177 del precursore secreto. IL-1ra1 intracellulare è di particolare interesse, poiché è stato riportato che viene "secreto" dalle cellule endoteliali e si lega all'IL-1 RI in modo antagonista. IL-1ra1 intracellulare è lungo 159 aa e mostra una sostituzione di 3 aa per i primi 21 aa della sequenza segnale di IL-1ra.

Siero/Plasma – In questo test è stata valutata la presenza di IL-1RA in trenta campioni provenienti da volontari apparentemente sani. Non erano disponibili le cartelle cliniche dei donatori.