Kit ELISA CTLA-4 umano
N. CAT. : AEH0179
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Sfondo
CTLA-4 (citotossico T-linfocita-4, designato CD152), è una molecola inibitoria transmembrana delle cellule T di tipo I che è un membro della superfamiglia Ig. Il cDNA CTLA-4 umano o murino codifica 223 aminoacidi (aa) inclusa una sequenza segnale di 35 aa, un dominio extracellulare (ECD) di 126 aa con un dominio di tipo V-simile a Ig-, una sequenza transmembrana (TM) di 21 aa e una sequenza citoplasmatica di 41 aa. Si trova come omodimero covalente di 41‑43 kDa. All'interno dell'ECD, il CTLA-4 umano condivide il 68%, il 71% e l'83‑86% di identità di sequenza aa con il topo, il ratto e il CTLA-4 suino/bovino/coniglio/felino/canino, rispettivamente. È possibile che venga secreta una forma di 174 aa priva di sequenze TM e citoplasmatiche (sCTLA-4). Sono riportate le isoforme di 56‑79 aa che contengono principalmente parti del dominio citoplasmatico. Nel topo, un'isoforma priva del dominio Ig-like ha attività inibitoria ligando-indipendente ed è denominata liCTLA-4. CD28, che è strutturalmente correlato a CTLA-4, è costitutivamente espresso sulle cellule T naïve e promuove l'attivazione delle cellule T quando impegnato da B7-2 sulle cellule presentanti l'antigene (APC) all'interno della sinapsi immunologica (IS). Al contrario, CTLA-4 viene reclutato dalle vescicole intracellulari nell'IS a partire da 1, 2 giorni dopo l'attivazione delle cellule T. Forma un reticolo lineare con B7‑1 sull'APC, inducendo segnali regolatori negativi e terminando l'attivazione delle cellule T. Abatacept, una proteina di fusione umana terapeutica CTLA-4-Ig (nome commerciale Orencia), compete con CD28 per il legame con B7-1 e B7-2 ed è stata utilizzata per antagonizzare l'attivazione delle cellule T in condizioni autoimmuni e per migliorare la sopravvivenza dei trapianti. I topi deleti per CTLA-4 non mostrano anomalie fino a dopo la nascita, ma poi sviluppano reazioni autoimmuni letali dovute alla continua attivazione delle cellule T e allo scarso controllo da parte delle cellule T regolatorie, che esprimono costitutivamente CTLA-4 nei topi selvatici-e nell'uomo.
Dati tipici
|
pg/ml |
D.O. |
Nella media |
Corretto |
|
|
0.00 |
0.0105 |
0.0103 |
0.0104 |
|
|
2.74 |
0.0171 |
0.0159 |
0.0165 |
0.0061 |
|
8.23 |
0.0282 |
0.0271 |
0.0277 |
0.0173 |
|
24.69 |
0.0616 |
0.0611 |
0.0614 |
0.0510 |
|
74.07 |
0.1683 |
0.1480 |
0.1582 |
0.1478 |
|
222.22 |
0.5143 |
0.4790 |
0.4967 |
0.4863 |
|
666.67 |
1.5540 |
1.5790 |
1.5665 |
1.5561 |
|
2000.00 |
3.9590 |
3.9100 |
3.9345 |
3.9241 |
Precisione
|
Precisione intra-test |
Precisione inter-test |
|||||
|
Numero del campione |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Media (pg/ml) |
53.1 |
266.2 |
814.9 |
17.2 |
77.5 |
231.4 |
|
Deviazione standard |
2.9 |
9.1 |
34.8 |
1.3 |
5.1 |
12.0 |
|
Coefficiente di variazione(%) |
5.5 |
3.4 |
4.3 |
7.8 |
6.6 |
5.2 |
Precisione intra-analisi (precisione tra analisi) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati sei volte su una piastra per valutare la precisione intra-analisi.
Recupero dei picchi
Il recupero del picco è stato valutato aggiungendo 3 livelli di CTLA-4 umano a un campione di siero umano sano. Il siero non addizionato è stato utilizzato come bianco in questo esperimento.
Il recupero variava dal 91% al 97% con un recupero medio complessivo del 94%.
Il recupero variava dal 91% al 97% con un recupero medio complessivo del 94%.
Valori campione
| Matrice del campione | Campione valutato | Intervallo (pg/ml) | Rilevabile (%) | Media rilevabile (pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| Siero | 30 | 0,31-3,78 | 100 | 1.11 |
Siero/Plasma – In questo test è stata valutata la presenza di CTLA-4 in trenta campioni provenienti da volontari apparentemente sani. Non erano disponibili le cartelle cliniche dei donatori.
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