Kit ELISA CD85d umano
Libretto del protocollo
Caratteristiche principali e dettagli
- Specie:
- Dimensioni:
- Volume del campione:
- Intervallo di curve standard:
- Tipo di analisi:
- Sensibilità:
- Durata dell'operazione:
- Tipo di analisi:
-
Marca:
N. CAT. :AEH0046
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Dimensioni:
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Dettagli del prodotto
Sfondo
Il trascritto immunoglobuline-like (ILT) comprende una famiglia di immunorecettori di tipo attivante e inibitorio i cui geni sono localizzati nello stesso locus che codifica per i recettori Ig-like delle cellule killer (KIR). ILT4, nota anche come LIR-2 e LILRB2, è una proteina transmembrana di tipo I espressa principalmente su monociti e cellule dendritiche (DC). L'ILT4 umano è prodotto come precursore di 598 aminoacidi (aa) che include una sequenza segnale di 21 aa, un dominio extracellulare (ECD) di 440 aa, un segmento transmembrana di 21 aa e un dominio citoplasmatico di 116 aa. L'ECD contiene quattro domini Ig-like e il dominio citoplasmatico contiene tre motivi inibitori basati sulla tirosina-immunorecettori (ITIM). L'ECD dell'ILT4 umano condivide il 76% dell'identità aa con l'ILT4 dello scimpanzé e il 74%, 81%, 33%, 52%, 77%, 61% e 64% dell'identità aa con l'ILT1, 2, 3, 5, 6, 7 e 8 umani, rispettivamente. ILT4 si lega alle proteine MHC I classiche così come alle molecole non-classiche HLA-G1 e HLA-F. Compete con CD8 alfa per il legame MHC I ma non compete con KIR2DL1. La legatura di ILT4 induce la fosforilazione di Tyr all'interno dei suoi ITIM citoplasmatici, un requisito per l'associazione con SHP-1. L'attivazione di ILT4 inibisce la segnalazione attraverso Fc gamma RI e Fc epsilon RI e fa sì che le DC diventino tollerogeniche mediante la sottoregolazione delle molecole costimolatorie. ILT4 media l'energia delle cellule T CD4+ indotte da DC tollerogeniche in vitro e in vivo.
Dati tipici
|
pg/ml |
D.O. |
Nella media |
Corretto |
|
|
0.00 |
0.0345 |
0.0329 |
0.0337 |
|
|
312.50 |
0.0936 |
0.0922 |
0.0929 |
0.0592 |
|
625.00 |
0.1418 |
0.1472 |
0.1445 |
0.1108 |
|
1250.00 |
0.2482 |
0.2518 |
0.2500 |
0.2163 |
|
2500.00 |
0.4908 |
0.4994 |
0.4951 |
0.4614 |
|
5000.00 |
0.9079 |
0.9281 |
0.9180 |
0.8843 |
|
10000.00 |
1.8010 |
1.8280 |
1.8145 |
1.7808 |
|
20000.00 |
3.2730 |
3.2200 |
3.2465 |
3.2128 |
Precisione
|
Precisione intra-test |
Precisione inter-test |
|||||
|
Numero del campione |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Media（pg/ml） |
278.4 |
1676.4 |
5340.2 |
335.2 |
1676.4 |
5347.2 |
|
Deviazione standard |
18.3 |
50.3 |
193.0 |
17.5 |
80.8 |
160.4 |
|
Coefficiente di variazione（%） |
6.6 |
3.0 |
3.6 |
5.2 |
4.8 |
3.0 |
- Precisione intra-test (Precisione all'interno di un test) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati venti volte su una piastra per valutare la precisione intra-test.
- Precisione intra-analisi (precisione tra analisi) Tre campioni con concentrazione nota sono stati analizzati sei volte su una piastra per valutare la precisione intra-analisi.
Recupero dei picchi
Il recupero del picco è stato valutato aggiungendo 3 livelli di CD85d umano a un campione di siero umano sano. Il siero non addizionato è stato utilizzato come bianco in questo esperimento.
Il recupero variava dall'80% al 127% con un recupero medio complessivo del 112%.
Il recupero variava dall'80% al 127% con un recupero medio complessivo del 112%.
Valori campione
|
Matrice del campione |
Campione valutato |
Intervallo (ng/ml) |
Rilevabile % |
Media rilevabile (ng/ml) |
|
Siero |
30 |
2.46-9.25 |
100 |
5.35 |
Siero/Plasma - In questo test è stata valutata la presenza di CD85d umano in trenta campioni provenienti da volontari apparentemente sani. Non erano disponibili le cartelle cliniche dei donatori.
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