Anticorpo policlonale di coniglio HSP60

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio anti-HSP60

Obiettivo: HSP60
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto, scimmia
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA07105

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

Chaperonin implicato nell'importazione delle proteine mitocondriali e nell'assemblaggio macromolecolare. Insieme a Hsp10, facilita il corretto ripiegamento delle proteine importate. Può anche prevenire il ripiegamento errato e promuovere il ripiegamento e il corretto assemblaggio dei polipeptidi non ripiegati generati in condizioni di stress nella matrice mitocondriale. Le unità funzionali di queste chaperonine sono costituite da anelli eptamericani della grande subunità Hsp60, che funzionano come un doppio anello back-to-back. In una reazione ciclica, i complessi dell'anello Hsp60 legano una proteina substrato non ripiegata per anello, seguito dal legame dell'ATP e dall'associazione con 2 anelli eptamericani della co-chaperonina Hsp10.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:200
SE/ICC	1:100 - 1:500

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio anti-HSP60
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina HSP60.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	Peptide sintetico coniugato KLH-che comprende una sequenza all'interno della regione C-term dell'HSP60 umano. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 61 kD; Osservato: 60 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	HSP60; Mitocondriale di proteina da shock termico da 60 kDa; chaperonina da 60 kDa; Chaperonina 60; CPN60; Proteina da shock termico 60; HSP-60; Hsp60; HuCHA60; Proteina della matrice mitocondriale P1; Proteina linfocitaria P60
Simbolo del gene	HSPD1
Entrez Gene	3329(Umano); 15510(Topo); 63868(Ratto)
SwissProt	P10809(Umano); P63038(Topo); P63039(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di HSP60 nei lisati di cellule intere di HEK293T (A), Hela (B), DLD (C), muscolo di topo (D), rene di topo (E), muscolo di ratto (F), rene di ratto (G). (Dimensione della banda prevista: 61 kD; Dimensione della banda osservata: 60 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione HSP60 nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro al seno umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione HSP60 nelle cellule NIH3T3. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera umidificata. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato DyLight 594- (rosso) in PBS a temperatura ambiente al buio. DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Analisi Western blot dell'espressione di HSP60 nei lisati di cellule HeLa wild type (WT) e knockdown (KD).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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