Anticorpo monoclonale murino GRP75 (C2754)

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Topo monoclonale al GRP75

Obiettivo: GRP75
Fonte/Ospite: Topo
Reattività: Umano, topo, ratto, scimmia
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC, FC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : AMA02366

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Chaperone mitocondriale che svolge un ruolo chiave nell'importazione, nel ripiegamento e nell'assemblaggio delle proteine mitocondriali. Svolge un ruolo essenziale nel sistema di controllo della qualità delle proteine, nel corretto ripiegamento delle proteine, nel ripiegamento delle proteine mal ripiegate e nel targeting delle proteine per la successiva degradazione. Questi processi si ottengono attraverso cicli di legame dell'ATP, idrolisi dell'ATP e rilascio di ADP, mediati da co-chaperoni. Nei mitocondri, si associa al complesso proteico TIM (translocasi della membrana interna) per assistere nell'importazione e nel ripiegamento delle proteine mitocondriali. Svolge un ruolo importante nella biogenesi mitocondriale dei cluster ferro-zolfo (ISC), interagisce e stabilizza le proteine di assemblaggio dei cluster ISC FXN, NFU1, NFS1 e ISCU.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:500
SE/ICC	1:100 - 1:500
FC	1:100 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Topo monoclonale al GRP75
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina GRP75
Tipo di anticorpo	Anticorpo primario
Immunogeno	Proteina di fusione ricombinante del GRP75 umano espressa in HEK293
Purificazione	Questo anticorpo viene purificato attraverso una colonna di proteina G.
Peso Molecolare	Previsto: 74 kD; Osservato: 74 kD kD
Modulo/Buffer	IgG2a di topo. Liquido in PBS, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% sodio azide.
Nomi alternativi	GRP75; HSPA9B; mt-HSP70; Stress-70 proteina, mitocondriale; 75 kDa glucosio-proteina regolata; VTR-75; Shock termico 70 kDa proteina 9; mortale; MOT; Peptide-proteina legante 74; PBP74
Simbolo del gene	HSPA9
Entrez Gene	3313(Umano); 15526(Topo)
SwissProt	P38646(Umano); P38647(Topo); P48721(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di GRP75 nei lisati di cellule intere Jurkat (A), HepG2 (B), A431 (C), Hela (D), K562 (E), MCF7 (F), C2C12 (G), A549 (H), PANC1 (I), PC12 (J), C6 (K), COS7 (L), NIH3T3 (M). (Dimensione della banda prevista: 74 kD; Dimensione della banda osservata: 74 kD kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione GRP75 nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro cervicale umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione GRP75 nelle cellule Hela. Le cellule fissate in formalina sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera nascosta. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 594 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Analisi citofluorimetrica delle cellule Jurkat utilizzando l'anticorpo Anti-GRP75 (verde) e il controllo negativo (rosso).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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