Anticorpo monoclonale di coniglio EpCAM (ARA801)

Caratteristiche principali e dettagli

  • Obiettivo: EpCAM
  • Fonte/Ospite: Coniglio
  • Reattività: Umano
  • Clonalità: Monoclonale
  • Applicazioni: WB,IHC,FC,IP
  • Coniugazione: Non coniugato
  • Stoccaggio: a-20°C
  • Marca:
Dettagli del prodotto
Sfondo
Può agire come una molecola di interazione fisica omofila tra le cellule epiteliali intestinali (IEC) e i linfociti intraepiteliali (IEL) nell'epitelio della mucosa per fornire una barriera immunologica come prima linea di difesa contro l'infezione della mucosa. Svolge un ruolo nella proliferazione e nella differenziazione delle cellule staminali embrionali. Up-regola l'espressione di FABP5, MYC e delle cicline A ed E.
Applicazione
Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB

1:2000-1:5000

IHC

1:1600-1:3200

FC

1:800-1:2000

IP

1:50

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.
Panoramica

Descrizione

Anticorpo monoclonale di coniglio contro EpCAM

Tipo di anticorpo

Anticorpo primario

MW previsto

35kDa

Immunogeno

Un peptide sintetico corrispondente ai residui aa1- 100 di EPCAM umano è stato utilizzato come immunogeno.

Purificazione

IgG purificate per affinità ProA

Modulo/Buffer

PBS 59%, Sodio azide 0,01%, Glicerolo 40%, BSA 0,76%.

Nomi alternativi

GA733-2; M1S2; M4S1; MIC18; TACSTD1; TROP1; Molecola di adesione delle cellule epiteliali; Ep-CAM; Antigene associato all'adenocarcinoma - Glicoproteina della superficie cellulare Trop-1; Antigene di superficie delle cellule epiteliali; Glicoproteina epiteliale; EGP; Glicoproteina epiteliale 314; EGP314; hEGP314; antigene KS 1/4; Arabia Saudita; Principale proteina GA733-2 associata al tumore gastrointestinale - Trasduttore del segnale del calcio associato al tumore 1; CD326

Simbolo del gene

EPCAM

Entrez Gene

4072(Umano)

Swissprot

P16422

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.
Dati

Tutte le corsie: anticorpo Anti-EpCAM alla diluizione 1:2.000
MW previsto: 35 kDa
MW osservato: 40 kDa

Corsia 1: HT-29
Corsia 2: T47D

Lisato a 10 µg per corsia
2° Ab:
GAR HRP(H+L) 1:5.000
Esposizione: anni '50

Analisi immunoistochimica (formalina/PFA-paraffina fissa-sezioni incluse) del tessuto uterino umano marcato EpCAM con ARA801 a 1:3.200. Il recupero dell'antigene mediato dal calore è stato eseguito utilizzando il tampone Tris/EDTA a pH 9,0.

Istogramma sovrapposto che mostra le cellule HCT-116 colorate con ARA801 (rosso). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 4% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con TritonX-100 allo 0,1% per 15 minuti. Le cellule sono state quindi incubate nell'anticorpo (ARA801, diluizione 1:800) in 1x PBS/1% BSA per 30 minuti a temperatura ambiente. L'anticorpo secondario utilizzato era un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) alla diluizione 1:2.000 per 20 minuti a temperatura ambiente. Come controllo è stato utilizzato un campione senza etichetta (nero).

EpCAM è stato immunoprecipitato da 0,4 mg di lisato di cellule intere HT-29 con ARA801 alla diluizione 1:50.
2° Ab:
GAR HRP per IP 1:500

Corsia 1: IP ARA801 nel lisato di cellule intere HT-29
Corsia 2: PBS invece di ARA801 nel lisato di cellule intere HT-29
Corsia 3: lisato di cellule intere HT-29, 10 µg (input)
Esposizione: 120s

Stoccaggio
Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.
Nota
Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.
Domande frequenti
Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?
Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.
Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?
Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.
La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?
SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.
Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?
La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.
Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?
Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.
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