Anticorpo policlonale di coniglio EGFR

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio anti-EGFR

Obiettivo: EGFR
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, SE/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA09231

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Leganti del recettore tirosina chinasi della famiglia EGF e attivazione di diverse cascate di segnalazione per convertire segnali extracellulari in risposte cellulari appropriate. I ligandi noti includono EGF, TGFA/TGF-alfa, AREG, epigene/EPGN, BTC/betacellulina, epiregulina/EREG e HBEGF/eparina-EGF legante. Il legame del ligando attiva il recettore homo- e/o eterodimerizzazione e autofosforilazione su residui citoplasmatici chiave. Il recettore fosforilato recluta proteine adattatrici come GRB2 che a loro volta attivano complesse cascate di segnalazione a valle. Attiva almeno 4 principali cascate di segnalazione a valle, inclusi i moduli RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 chinasi-AKT, PLCgamma-PKC e STATs. Può anche attivare la cascata di segnalazione NF-kappa-B.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
SE/ICC	1:100 - 1:500

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio anti-EGFR
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina EGFR.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	KLH-peptide sintetico coniugato che comprende una sequenza all'interno della regione C-term dell'EGFR umano. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 134 kD; Osservato: 175 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	ERBB; ERBB1; HER1; Recettore del fattore di crescita epidermico; Proto-oncogene c-ErbB-1; Recettore tirosina-proteina chinasi erbB-1
Simbolo del gene	EGFR
Entrez Gene	1956(Umano); 13649(Topo)
SwissProt	P00533(Umano); Q01279(Mouse)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di EGFR nei lisati di cellule intere di HCC827 (A), A549 (B), polmone di topo (C), polmone di ratto (D). (Dimensione della banda prevista: 134 kD; Dimensione della banda osservata: 175 kD)

Analisi immunofluorescente della colorazione EGFR nelle cellule MDAMB231. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera nascosta. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 594 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Analisi Western blot dell'espressione di EGFR nei lisati di cellule HeLa wild type (WT) e knockdown (KD).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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