Anticorpo monoclonale di coniglio EGFR (ARA750)

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Obiettivo: EGFR
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB,SE/ICC,FC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. :ARA6537

US$ Scegli

Dimensioni:

100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

Anticorpo monoclonale di coniglio ricombinante EGFR Scheda tecnica del prodotto Peso molecolare previsto: 134 kDa Purezza: IgG purificati per affinità ProA Reattività crociata delle specie: Umana Forma: Liquido Reattività crociata delle specie determinata da WB Swissprot ID: P00533 Applicazioni: WB IF/ICC FC Background: I ligandi del recettore tirosina chinasi della famiglia EGF e l'attivazione di diverse cascate di segnalazione per convertire segnali extracellulari in risposte cellulari appropriate. Ligandi noti includono EGF, TGFA/TGF- alfa, anfiregolina,

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:2000-1:5000
SE/ICC	1:100-1:400
FC	1:20-1:100

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo monoclonale di coniglio contro l'EGFR
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
MW previsto	134kDa
Immunogeno	Come immunogeno è stato utilizzato un peptide sintetico corrispondente ai residui di EGFR all'interno della porzione aa1000-1100 (intracellulare) dell'EGFR umano.
Purificazione	IgG purificate per affinità ProA
Modulo/Buffer	PBS 59%, Sodio azide 0,01%, Glicerolo 40%, BSA 0,25%.
Nomi alternativi	ERBB; ERBB1; HER1; Recettore del fattore di crescita epidermico; Proto-oncogene c-ErbB-1; Recettore tirosina-proteina chinasi erbB-1
Simbolo del gene	EGFR
Entrez Gene	1956(Umano); 13649(Topo)
Swissprot	P00533

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Tutte le corsie: anticorpo anti-EGFR alla diluizione 1:2.500
MW previsto: 134 kDa
MW osservato: 175 kDa
Corsia 1: Hela
Corsia 2: A431

Lisare a 10 µg per corsia
2° Ab:
G&R HRP(H+L) 1:10.000
Esposizione: 120s

Istogramma sovrapposto che mostra le cellule A431 colorate con ARA750 (rosso). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 4% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con TritonX-100 allo 0,1% per 15 minuti. Le cellule sono state quindi incubate nell'anticorpo (ARA750, diluizione 1:100) in 1x PBS/1% BSA per 30 minuti a temperatura ambiente. L'anticorpo secondario utilizzato era un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor^® 488 (IgG H+L) alla diluizione 1:2.000 per 20 minuti a temperatura ambiente. Come controllo è stato utilizzato un campione senza etichetta (nero).

Colorazione ARA750 dell'EGFR nelle cellule A431 mediante IF/ICC (immunofluorescenza/immunocitochimica). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide, permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% e bloccate con siero di capra al 10% per mezz'ora a temperatura ambiente. I campioni sono stati incubati con l'anticorpo primario (1:400) a 4°C. Come anticorpo secondario (1:500) è stato utilizzato un policlonale IgG di capra anti-coniglio coniugato con Alexa Fluor^® 488-. DAPI (blu) è stato utilizzato come controcolorante nucleare.
Controllo: PBS e anticorpo secondario, An Alexa Fluor^® 488-coniugato Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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