Anticorpo monoclonale murino EGFR (C3553)

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo monoclonale murino anti-EGFR

Obiettivo: EGFR
Fonte/Ospite: Topo
Reattività: Umano
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB, IHC, FC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : AMA03165

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Leganti del recettore tirosina chinasi della famiglia EGF e attivazione di diverse cascate di segnalazione per convertire segnali extracellulari in risposte cellulari appropriate. I ligandi noti includono EGF, TGFA/TGF-alfa, AREG, epigene/EPGN, BTC/betacellulina, epiregulina/EREG e HBEGF/eparina-EGF legante. Il legame del ligando attiva il recettore homo- e/o eterodimerizzazione e autofosforilazione su residui citoplasmatici chiave. Il recettore fosforilato recluta proteine adattatrici come GRB2 che a loro volta attivano complesse cascate di segnalazione a valle. Attiva almeno 4 principali cascate di segnalazione a valle, inclusi i moduli RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 chinasi-AKT, PLCgamma-PKC e STATs. Può anche attivare la cascata di segnalazione NF-kappa-B.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:200
FC	1:10 - 1:50

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo monoclonale murino anti-EGFR
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina EGFR.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	Proteina di fusione ricombinante dell'EGFR umano. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	Questo anticorpo viene purificato attraverso una colonna di proteina G.
Peso Molecolare	Previsto: 134 kD; Osservato: 175 kD
Modulo/Buffer	IgG1 di topo. Liquido in PBS, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% sodio azide.
Nomi alternativi	ERBB; ERBB1; HER1; Recettore del fattore di crescita epidermico; Proto-oncogene c-ErbB-1; Recettore tirosina-proteina chinasi erbB-1
Simbolo del gene	EGFR
Entrez Gene	1956(Umano)
SwissProt	P00533(Umano)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di EGFR nei lisati di cellule intere A431 (A), MDAMB468 (B). (Dimensione della banda prevista: 134 kD; Dimensione della banda osservata: 175 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione dell'EGFR nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di adenocarcinoma polmonare umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi citofluorimetrica delle cellule Hela utilizzando l'anticorpo anti-EGFR. Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 2% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con metanolo al 90% per 10 minuti. Le cellule sono state incubate in albumina di siero bovino al 2% per bloccare le interazioni proteina-proteina non specifiche seguite dall'anticorpo a 37 °C per 60 minuti. L'anticorpo secondario Goat Anti-Mouse IgG (H&L) - AREX® Fluor 488 è stato incubato a 37 °C per 40 minuti. L'anticorpo di controllo dell'isotipo (linea blu) è stato utilizzato nelle stesse condizioni.

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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