Anticorpo monoclonale murino DNA-PKcs (C3467)

Scheda di sicurezza

DNA-PKcs Mouse Monoclonal Antibody(C3467)

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo monoclonale murino anti-DNA-PKcs

Obiettivo: DNA-PKcs
Fonte/Ospite: Topo
Reattività: Umano
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC, IP
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : AMA03079

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Serina/treonina-proteina chinasi che agisce come sensore molecolare per i danni al DNA. Coinvolto nella giunzione delle estremità non omologhe del DNA (NHEJ) necessaria per la riparazione della rottura del doppio filamento (DSB) e la ricombinazione V(D)J. Deve essere legato al DNA per esprimere le sue proprietà catalitiche. Promuove l'elaborazione delle strutture del DNA a forcina nella ricombinazione V(D)J mediante l'attivazione dell'endonucleasi a forcina artemide (DCLRE1C). Reclutato da XRCC5 e XRCC6 alle estremità del DNA ed è tenuto a (1) proteggere e allineare le estremità rotte del DNA, prevenendo così la loro degradazione, (2) e sequestrare il DSB per la riparazione da parte di NHEJ. Agisce come una proteina impalcatura per favorire la localizzazione delle proteine di riparazione del DNA nel sito del danno. L'assemblaggio del complesso DNA - PK alle estremità del DNA è richiesto anche per la fase di legatura NHEJ.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:100
SE/ICC	1:50 - 1:100
IP	1:10 - 1:50

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo monoclonale murino anti-DNA-PKcs
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina DNA-PKcs.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	Frammenti purificati della proteina DNA-PKcs umana ricombinante espressi in E.coli
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 469 kD; Osservato: 450 kD
Modulo/Buffer	Liquido in PBS contenente 50% glicerolo, 0,5% BSA e 0,02% sodio azide, pH 7,3.
Nomi alternativi	HYRC; HYRC1; Subunità catalitica della proteina chinasi dipendente dal DNA; Subunità catalitica DNA-PK; DNA-PKc; DNPK1; p460
Simbolo del gene	PRKDC
Entrez Gene	5591(Umano)
SwissProt	P78527(Umano)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di DNA - PKcs nei lisati di cellule intere Hela (A), K562 (B). (Dimensione della banda prevista: 469 kD; Dimensione della banda osservata: 450 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione DNA - PKcs nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di carcinoma mammario umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione DNA-PKcs nelle cellule HeLa. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera nascosta. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio.

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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