Anticorpo monoclonale di coniglio citocheratina 7 (ARA806)

Caratteristiche principali e dettagli

  • Obiettivo: Citocheratina 7
  • Fonte/Ospite: Coniglio
  • Reattività: Umano
  • Clonalità: Monoclonale
  • Applicazioni: WB,IHC,IF/ICC,FC,IP
  • Coniugazione: Non coniugato
  • Stoccaggio: a-20°C
  • Marca:
Dettagli del prodotto
Sfondo
Blocca l'interfase interferone-dipendente e stimola la sintesi del DNA nelle cellule. Coinvolto nella regolazione traslazionale dell'mRNA del papillomavirus umano tipo 16 E7 (HPV16 E7).
Applicazione
Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB

1:2000-1:5000

IHC

1:1600-1:3200

SE/ICC

1:800-1:2000

FC

1:200-1:800

IP

1:50

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.
Panoramica

Descrizione

Anticorpo monoclonale di coniglio contro la citocheratina 7

Tipo di anticorpo

Anticorpo primario

MW previsto

51kDa

Immunogeno

Un peptide sintetico corrispondente ai residui aa1- 100 di citocheratina 7 è stato utilizzato come immunogeno.

Purificazione

IgG purificate per affinità ProA

Modulo/Buffer

PBS 59%, Sodio azide 0,01%, Glicerolo 40%, BSA 0,81%.

Nomi alternativi

SCL; Cheratina, citoscheletrico di tipo II 7; Citocheratina-7; TC-7; Cheratina-7; K7; Sarcolectina; Cheratina di tipo-II Kb7

Simbolo del gene

KRT7

Entrez Gene

3855(Umano)

Swissprot

P08729

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.
Dati

Tutte le corsie: anticorpo anti-citocheratina 7 alla diluizione 1:10.000
MW previsto: 51 kDa
MW osservato: 51 kDa

Corsia 1: Hela
Corsia 2: A549
Corsia 3: HaCat

Lisati a 10 µg per corsia
2° Ab:
GAR HRP(H+L) 1:5.000
Esposizione: anni '60

Analisi immunoistochimica (formalina/PFA-paraffina fissa-sezioni incluse) del tessuto di cancro della tiroide umano marcante citocheratina 7 con ARA806 a 1:3.200. Il recupero dell'antigene mediato dal calore è stato eseguito utilizzando il tampone Tris/EDTA a pH 9,0.

Colorazione ARA806 della citocheratina 7 nelle cellule Hela mediante IF/ICC (immunofluorescenza/immunocitochimica). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide, permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% e bloccate con siero di capra al 10% per mezz'ora a temperatura ambiente. I campioni sono stati incubati con l'anticorpo primario (1:2.000) a 4°C. Come anticorpo secondario (1:500) è stato utilizzato un policlonale IgG di capra anti-coniglio coniugato con Alexa Fluor® 488-. DAPI (blu) è stato utilizzato come controcolorante nucleare.
Controllo: PBS e anticorpo secondario, An Alexa Fluor® 488-coniugato Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Istogramma sovrapposto che mostra le cellule Hela colorate con ARA806 (rosso). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 4% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con TritonX-100 allo 0,1% per 15 minuti. Le cellule sono state quindi incubate nell'anticorpo (ARA806, diluizione 1:800) in 1x PBS/1% BSA per 30 minuti a temperatura ambiente. L'anticorpo secondario utilizzato era un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) alla diluizione 1:2.000 per 20 minuti a temperatura ambiente. Come controllo è stato utilizzato un campione senza etichetta (nero).

La citocheratina 7 è stata immunoprecipitata da 0,4 mg di lisato di cellule intere Hela con ARA806 alla diluizione 1:50.
2° Ab:
GAR HRP per IP 1:500

Corsia 1: ARA806 IP nel lisato di cellule intere Hela
Corsia 2: PBS invece di ARA806 nel lisato di cellule intere Hela
Corsia 3: lisato di cellule intere Hela, 10 µg (input)
Esposizione: anni '50

Stoccaggio
Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.
Nota
Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.
Domande frequenti
Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?
Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.
Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?
Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.
La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?
SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.
Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?
La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.
Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?
Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.
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