Anticorpo monoclonale murino CD45 (C2924)

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Topo monoclonale al CD45

Obiettivo: CD45
Fonte/Ospite: Topo
Reattività: Umano, topo, ratto
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC, FC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : AMA02536

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Proteina tirosina-proteina fosfatasi necessaria per l'attivazione delle cellule T-attraverso il recettore dell'antigene. Agisce come regolatore positivo della coattivazione delle cellule T-dopo il legame con DPP4. Il primo dominio della PTPasi ha attività enzimatica, mentre il secondo sembra influenzare la specificità di substrato del primo. All'attivazione delle cellule T-, recluta e defosforila SKAP1 e FYN. Defosforila LYN e quindi modula l'attività di LYN. Interagisce con CLEC10A al contatto tra cellule presentanti l'antigene-cellule T; CLEC10A sulle cellule dendritiche immature riconosce l'antigene Tn che trasporta il recettore PTPRC/CD45 sulle cellule T effettrici e modula la soglia di attivazione delle cellule T per limitare l'autoreattività.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:500
SE/ICC	1:100 - 1:500
FC	1:100 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Topo monoclonale al CD45
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina CD45
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	Proteina di fusione ricombinante del CD45 umano espressa in E. Coli
Purificazione	Questo anticorpo viene purificato attraverso una colonna di proteina G.
Peso Molecolare	Previsto: 148 kD; Osservato: 148 kD kD
Modulo/Buffer	IgG1 di topo. Liquido in PBS, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% sodio azide.
Nomi alternativi	CD45; Recettore-tipo tirosina-proteina fosfatasi C; Antigene comune dei leucociti; L-CA; T200; CD45
Simbolo del gene	PTPRC
Entrez Gene	5788(Umano); 19264(Topo); 24699(Ratto)
SwissProt	P08575(Umano); P06800(Mouse); P04157(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di CD45 nei lisati di cellule intere di Jurkat (A), siero di ratto (B), siero di topo (C). (Dimensione della banda prevista: 148 kD; Dimensione della banda osservata: 148 kD kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione CD45 nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di tonsille umane. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione CD45 nelle cellule Hela. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera nascosta. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 594 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Analisi citofluorimetrica delle cellule HeLa utilizzando l'anticorpo anti-CD45 (verde) e il controllo negativo (rosso).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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