Anticorpo monoclonale di coniglio CD34 (ARA815)

Tutte le corsie: anticorpo anti-CD34 alla diluizione 1:5.000
MW previsto: 41 kDa
MW osservato: 120 kDa
Corsia 1: TF-1
Lisati a 10 µg per corsia
2° Ab:
GAR HRP(H+L) 1:5.000
Esposizione: anni '60

Analisi immunoistochimica (formalina/PFA-paraffina fissa-sezioni incluse) del tessuto tonsillare umano marcante CD34 con ARA815 a 1:12.800. Il recupero dell'antigene mediato dal calore è stato eseguito utilizzando il tampone Tris/EDTA a pH 9,0.

Colorazione ARA815 del CD34 nelle cellule TF-1 mediante IF/ICC (immunofluorescenza/immunocitochimica). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide, permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% e bloccate con siero di capra al 10% per mezz'ora a temperatura ambiente. I campioni sono stati incubati con l'anticorpo primario (1:200) a 4°C. Come anticorpo secondario (1:500) è stato utilizzato un policlonale IgG di capra anti-coniglio coniugato con Alexa Fluor^® 488-. DAPI (blu) è stato utilizzato come controcolorante nucleare.
Controllo: PBS e anticorpo secondario, An Alexa Fluor^® 488-coniugato Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Istogramma sovrapposto che mostra le cellule TF-1 colorate con ARA815 (rosso). Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 4% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con TritonX-100 allo 0,1% per 15 minuti. Le cellule sono state quindi incubate nell'anticorpo (ARA815, diluizione 1:10.000) in 1x PBS/1% BSA per 30 minuti a temperatura ambiente. L'anticorpo secondario utilizzato era un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor^® 488 (IgG H+L) alla diluizione 1:2.000 per 20 minuti a temperatura ambiente. Come controllo è stato utilizzato un campione senza etichetta (nero).

CD34 è stato immunoprecipitato da 0,4 mg di lisato di cellule intere TF-1 con ARA815 alla diluizione 1:100.
2° Ab:
GAR HRP per IP 1:500
Corsia 1: IP ARA815 nel lisato di cellule intere TF-1
Corsia 2: PBS invece di ARA815 nel lisato di cellule intere TF-1
Corsia 3: TF-1 lisato di cellule intere, 10 µg (input)
Esposizione: 120s