Anticorpo policlonale di coniglio Caspase 3

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio contro la Caspasi 3

Obiettivo: Caspasi 3
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto, bovino, cane, scimmia, pesce zebra
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA06731

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Proteasi tiolica che agisce come una delle principali caspasi effettrici coinvolte nella fase di esecuzione dell'apoptosi. Dopo la scissione e l'attivazione da parte delle caspasi iniziatrici (CASP8, CASP9 e/o CASP10), media l'esecuzione dell'apoptosi catalizzando la scissione di molte proteine. All'inizio dell'apoptosi, scinde proteoliticamente la poli(ADP-ribosio) polimerasi PARP1 con un legame '216-Asp---Gly-217'. Scinde e attiva le proteine leganti gli elementi regolatori degli steroli (SREBP) tra il dominio di base della cerniera della leucina elica-ansa-elica e il dominio di attacco della membrana. Scinde e attiva le caspasi-6, -7 e -9 (CASP6, CASP7 e CASP9, rispettivamente). Scinde e inattiva l'interleuchina-18 (IL18). Coinvolto nella scissione dell'huntingtina. Innesca l'adesione cellulare nei neuroni simpatici attraverso la scissione del RET.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:200
SE/ICC	1:100 - 1:500

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio contro la Caspasi 3
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina Caspase 3.
Tipo di anticorpo	Anticorpo primario
Immunogeno	KLH-peptide sintetico coniugato che comprende una sequenza all'interno della regione centrale della Caspasi 3 umana. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 31 kD; Osservati: 35; 17 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	CPP32; Caspasi-3; CASP-3; Apopain; Proteasi cisteina CPP32; CPP-32; Proteine Yama; Attività di scissione SREBP 1; SCA-1
Simbolo del gene	CASP3
Entrez Gene	836(Umano); 12367(Topo); 25402(Ratto)
SwissProt	P42574(Umano); P70677(Topo); P55213(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di Caspasi 3 nei lisati di cellule intere di Hela (A), SGC7901 (B), EC9706 (C), fegato di topo (D), milza di topo (E), fegato di ratto (F). (Dimensione della banda prevista: 31 kD; Dimensione della banda osservata: 35; 17 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione della Caspasi 3 nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro polmonare umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione della Caspasi 3 nelle cellule HeLa. Le cellule fissate in formalina sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera umidificata. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato DyLight 594- (rosso) in PBS a temperatura ambiente al buio. DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Analisi Western blot dell'espressione di Caspasi 3 nei lisati di cellule intere di HEK293T (A), HUT78 (B), MCF7 (C), milza di topo (D), cervello di topo (E), milza di ratto (F), cervello di ratto (G).

Analisi Western blot dell'espressione di Caspasi 3 nei lisati di cellule HeLa wild type (WT) e knockdown (KD).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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