c-Met (Phospho-Y1349) Anticorpo policlonale di coniglio

Scheda di sicurezza

c-Met (Phospho-Y1349) Rabbit Polyclonal Antibody

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio contro c-Met (Phospho-Y1349)

Obiettivo: c-Met (Fosfo-Y1349)
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto, bovino, maiale
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA09730

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Recettore tirosina chinasi che trasduce i segnali dalla matrice extracellulare nel citoplasma legandosi al fattore di crescita degli epatociti/ligando HGF. Regola molti processi fisiologici tra cui proliferazione, dispersione, morfogenesi e sopravvivenza. Il legame del ligando sulla superficie cellulare induce l'autofosforilazione di MET sul suo dominio intracellulare che fornisce siti di aggancio per le molecole di segnalazione a valle. Dopo l'attivazione da parte del ligando, interagisce con la subunità PI3-chinasi PIK3R1, PLCG1, SRC, GRB2, STAT3 o con l'adattatore GAB1. Il reclutamento di questi effettori a valle da parte di MET porta all'attivazione di diverse cascate di segnalazione tra cui RAS-ERK, PI3 chinasi-AKT o PLCgamma-PKC.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:100
SE/ICC	1:50 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio contro c-Met (Phospho-Y1349)
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina c-Met solo quando fosforilata a Y1349.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	KLH-fosfopeptide sintetico coniugato corrispondente ai residui che circondano Y1349 della proteina c-Met umana. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 155 kD; Osservati: 145; 170 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	Recettore del fattore di crescita degli epatociti; Recettore HGF; Recettore HGF/SF; Proto-oncogene c-Met; Recettore del fattore di dispersione; recettore SF; Tirosina-proteina chinasi Met
Simbolo del gene	INCONTRATO
Entrez Gene	4233(Umano); 24553(Ratto)
SwissProt	P08581(Umano); P16056(Topo); P97523(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di c-Met (Phospho-Y1349) nei lisati di cellule intere CT26 (A), fegato di ratto (B), HEK293T (C), LO2 (D). (Dimensione della banda prevista: 155 kD; Dimensione della banda osservata: 145; 170 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione c-Met (Phospho-Y1349) in una sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro del colon-retto umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione c-Met (Phospho-Y1349) nelle cellule LO2. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera nascosta. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 594 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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