Anticorpo policlonale di coniglio ATG7

Scheda tecnica

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio anti-ATG7

Obiettivo: ATG7
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA13321

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

Enzima attivante E1-like coinvolto nei 2 sistemi ubiquitin-like necessari per il trasporto dal citoplasma al vacuolo (Cvt) e per l'autofagia. Attiva ATG12 per la sua coniugazione con ATG5 e le proteine della famiglia ATG8 per la loro coniugazione con fosfatidiletanolammina. Entrambi i sistemi sono necessari per l'associazione dell'ATG8 alle vescicole Cvt e alle membrane degli autofagosomi. Necessario per la morte autofagica indotta dall'inibizione della caspasi-8. Facilita la lipidazione di LC3-I con fosfatidiletanolamina per formare LC3-II che si trova sulle membrane autofagosomiali e sull'autofagia. Attiva ATG12 per la sua coniugazione con ATG5 e le proteine della famiglia ATG8 per la loro coniugazione con fosfatidiletanolammina. Entrambi i sistemi sono necessari per l'associazione dell'ATG8 alle vescicole Cvt e alle membrane degli autofagosomi.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:2000
IHC	1:50 - 1:200
SE/ICC	1:50 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio anti-ATG7
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina ATG7.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	Proteina di fusione ricombinante dell'ATG7 umano
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 68; Osservato: 78 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	APG7L; Modificatore simile all'ubiquitina - enzima attivante ATG7; ATG12-enzima attivante E1 ATG7; Proteina 7 correlata all'autofagia - APG7-mi piace; hAGP7; Proteina simile all'enzima E1-attivante l'ubiquitina
Simbolo del gene	ATG7
Entrez Gene	10533(Umano); 74244(Topo); 312647(Ratto)
SwissProt	O95352(Umano); Q9D906(Topo); Q641Y5(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di ATG7 nei lisati di cellule intere di THP1 (A), HeLa (B), rene di topo (C), fegato di ratto (D). (Dimensione della banda prevista: 68; 75; 77 kD; Dimensione della banda osservata: 78 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione ATG7 nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro del colon umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione ATG7 nelle cellule NIH3T3. Le cellule fissate in formalina sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera umidificata. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 594- (rosso) in PBS a temperatura ambiente al buio. DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico, terapeutico, profilattico o in vivo.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento dello sfondo o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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